本文關(guān)鍵詞：大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)方法的改進(jìn)

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【摘要】：目的:改進(jìn)大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs)原代培養(yǎng)方法,以獲取純化的大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞。方法:應(yīng)用Wistar大鼠,采用改進(jìn)的組織塊貼壁法分離、培養(yǎng)肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞;光鏡觀察細(xì)胞形態(tài);Ⅷ因子相關(guān)抗原免疫細(xì)胞化學(xué)法及植物凝集素BSI結(jié)合實驗鑒定培養(yǎng)的PMVECs。結(jié)果:體外培養(yǎng)的原代PMVECs在光鏡下呈短梭形或多角形,形成單層后呈鋪路石樣排列,但隨著傳代或培養(yǎng)條件的改變,細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化;Ⅷ因子相關(guān)抗原染色陰性,異植物凝集素BSI結(jié)合實驗陽性。結(jié)論:通過改進(jìn)的PMVECs分離、培養(yǎng)方法獲得的細(xì)胞生長狀態(tài)良好,純度高,且能夠穩(wěn)定地傳代培養(yǎng)。細(xì)胞形態(tài)觀察結(jié)合免疫細(xì)胞化學(xué)法是目前較為理想的PMVECs鑒定方法。
【作者單位】： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所;龍口市人民醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 分離 培養(yǎng) 鑒定
【基金】：國家自然科學(xué)基金(30800904) “重大新藥創(chuàng)新”科技重大專項(2008ZX09305-003)
【分類號】：R363
【正文快照】： 急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征(ALI/ARDS)的中心環(huán)節(jié)是肺血氣屏障(blood-air barrier,BAB)的破壞,導(dǎo)致液體、蛋白質(zhì)、炎癥細(xì)胞通過BAB進(jìn)入肺泡[1,2]。因此,BAB作為ALI/ARDS的靶器官日益引起研究者的關(guān)注。BAB主要包括肺泡上皮屏障和肺微血管內(nèi)屏障。而肺微血管內(nèi)屏障是血管

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