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用小鼠模型分析可溶性表達(dá)結(jié)核分枝桿菌Ag85A的免疫原性

發(fā)布時(shí)間:2017-08-30 05:13

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【摘要】:【目的】可溶性表達(dá)結(jié)核分枝桿菌Ag85A蛋白,并評(píng)價(jià)其免疫原性!痉椒ā坷美湫菘吮磉_(dá)質(zhì)粒和含有伴侶質(zhì)粒的大腸桿菌對(duì)Ag85A蛋白進(jìn)行可溶性原核表達(dá),并進(jìn)行純化與鑒定,通過(guò)C57BL/6小鼠模型對(duì)Ag85A蛋白的免疫原性,包括誘導(dǎo)機(jī)體特異性體液免疫應(yīng)答和細(xì)胞免疫應(yīng)答水平進(jìn)行分析!窘Y(jié)果】重組菌誘導(dǎo)后裂解上清中檢測(cè)到可溶性Ag85A蛋白的表達(dá),經(jīng)過(guò)親和層析純化收獲了純度在90%以上的Ag85A蛋白,Western blot鑒定顯示其具有較好的免疫反應(yīng)性。Ag85A蛋白免疫小鼠后,血清中可以檢測(cè)到高水平的Ig G抗體效價(jià),其中Ig G2b水平要高于Ig G1。通過(guò)特異性多肽、蛋白刺激脾臟和腹股溝淋巴結(jié)細(xì)胞可分泌高水平的IFN-γ、TNF-α等Th1型細(xì)胞因子!窘Y(jié)論】實(shí)現(xiàn)了Ag85A蛋白的可溶性表達(dá),免疫特性評(píng)價(jià)顯示Ag85A蛋白可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生強(qiáng)烈的特異性體液免疫應(yīng)答及Th1型的細(xì)胞免疫應(yīng)答,從而為其進(jìn)一步免疫學(xué)功能的研究奠定了重要基礎(chǔ)。
【作者單位】: 揚(yáng)州大學(xué)江蘇省人獸共患病學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/江蘇省動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關(guān)鍵詞】結(jié)核分枝桿菌 AgA 可溶性表達(dá) 免疫原性
【基金】:國(guó)家“973計(jì)劃”(2012CB518805) 江蘇省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃(BE2015343) 揚(yáng)州市自然科學(xué)基金(YZ2014027) 國(guó)家自然科學(xué)基金(31201882) 江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目~~
【分類(lèi)號(hào)】:R-332;R392
【正文快照】: Ag85復(fù)合物是結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌卡介苗主要的分泌型蛋白,在結(jié)核分枝桿菌H37Rv株中占分泌蛋白總量的30%左右,可從早期培養(yǎng)物中分離,是一種極不穩(wěn)定的蛋白,經(jīng)SDS-PAGE和等電聚焦分析可以將其分為3個(gè)組分Ag85A、Ag85B和Ag85C,大小分別為31 k Da、30k Da和31.5 k Da,結(jié)核分

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

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4 代東發(fā);袁方;于坤;梁飛;劉楠;龍娟;趙曉;奚永志;孫玉英;;HLA-B* 2705分子結(jié)構(gòu)對(duì)其在原核細(xì)胞可溶性表達(dá)影響的研究[J];軍事醫(yī)學(xué);2013年08期

5 何紅秋;賈渝躍;;HIV-1整合酶核心區(qū)可溶性表達(dá)及抑制劑篩選[J];中國(guó)生物工程雜志;2012年03期

6 聶恒;吳利先;;結(jié)核分枝桿菌重組Mtb8.1蛋白自誘導(dǎo)表達(dá)與抗原性分析[J];中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào);2014年05期

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