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人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離培養(yǎng)和鑒定

發(fā)布時(shí)間:2017-08-29 12:46

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【摘要】:目的建立簡(jiǎn)便、可靠、高效的體外分離培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的方法。方法利用2型膠原蛋白酶消化處理臍帶分離HUVEC,采用內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基(ECM)進(jìn)行培養(yǎng)。相差倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),免疫熒光技術(shù)檢測(cè)馮·維勒布蘭德因子(v WF)的表達(dá),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面CD31的水平鑒定細(xì)胞的純度,體外成管實(shí)驗(yàn)檢測(cè)凍存后內(nèi)皮細(xì)胞的功能。結(jié)果成功分離培養(yǎng)出純度高、活性好的HUVEC。原代HUVEC分離1周即可匯合成單層,細(xì)胞呈典型的鵝卵石狀排列,免疫熒光技術(shù)證明細(xì)胞廣泛表達(dá)v WF、CD31陽性細(xì)胞頻數(shù)達(dá)93.1%。凍存后的細(xì)胞依然能形成管腔結(jié)構(gòu),證明標(biāo)準(zhǔn)化的凍存方法能很好地維持細(xì)胞的功能。結(jié)論建立了簡(jiǎn)便、可靠、高效的體外分離培養(yǎng)HUVEC的方法。
【作者單位】: 新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)研究院 新疆心血管病研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心臟中心;
【關(guān)鍵詞】人臍靜脈 內(nèi)皮細(xì)胞 培養(yǎng)鑒定 血管新生
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81160026)
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 血管內(nèi)皮細(xì)胞是位于血管內(nèi)壁的一種具有多種生理功能的單層細(xì)胞,可產(chǎn)生和分泌多種生物活性物質(zhì),在血管的生物構(gòu)建、血壓調(diào)節(jié)、抗凝血、維持機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的平衡等方面具有重要作用[1-2]。血管內(nèi)皮細(xì)胞受損、功能紊亂是高血壓[3]、動(dòng)脈粥樣硬化[4]以及冠心病[5]等多種心血管疾病

【相似文獻(xiàn)】

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7 陳世義,馬剛,于海濱;人工真皮成纖維細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2002年04期

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4 陳波特;兔尿源性干細(xì)胞的分離培養(yǎng)、鑒定及其生物學(xué)特性的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2015年



本文編號(hào):753385

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