本文關鍵詞：SCAP重組腺病毒對ATDC5細胞增殖和凋亡的影響

  更多相關文章： 固醇調節(jié)元件結合蛋白裂解激活蛋白 重組腺病毒 ATDC細胞 細胞凋亡

【摘要】：目的構建固醇調節(jié)元件結合蛋白裂解激活蛋白(SRREBP cleavage activating protein,SCAP)基因干擾(small interfering RNA,siRNA)和過表達重組腺病毒,觀察其對ATDC5軟骨干細胞增殖及凋亡的影響。方法應用pAd EasyTM腺病毒載體系統(tǒng)構建重組腺病毒質粒p Ad-SCAPsiRNA和p AdSCAP,在HEK293細胞中分別包裝和擴增。RT-PCR和Western blot檢測ATDC5細胞中SCAP的表達,流式細胞儀檢測SCAP腺病毒對ATDC5細胞周期和凋亡的影響,Western blot檢測凋亡相關蛋白Cleaved Caspase-3、p-JNK的表達。結果成功獲腺病毒si SCAP(滴度為2.5×10~(10)PFU/m L)和Ad-SCAP(滴度為3.0×10~(11)PFU/m L)。RT-PCR和Western blot結果表明:siSCAP和Ad-SCAP能分別有效抑制和增強ATDC5細胞中SCAP的表達。流式細胞儀檢測結果表明:與正常組和空病毒組比較,si SCAP腺病毒處理組S期細胞比例升高15.45%和16.07%(P0.05),Ad-SCAP組比例降低14.27%和13.45%(P0.05);siSCAP組細胞凋亡率降低13.10%和11.50%(P0.05),Ad-SCAP組升高10.51%和10.17%(P0.05)。Western blot檢測結果與流式細胞儀檢測結果一致。結論成功構建SCAP腺病毒;敲低SCAP能促進ATDC5細胞增殖并抑制凋亡;過表達SCAP則抑制增殖、促進凋亡。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院細胞生物學與遺傳學教研室;
【關鍵詞】： 固醇調節(jié)元件結合蛋白裂解激活蛋白 重組腺病毒 ATDC細胞 細胞凋亡
【基金】：國家自然科學基金面上項目(81371928,81171697) 教育部新世紀優(yōu)秀人才支持計劃(NECT-12-1090)~~
【分類號】：R363
【正文快照】：

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 韓曉鳳;李美玲;張鵬;夏飛;郭風勁;;siIRE1α重組腺病毒對內質網(wǎng)應激介導凋亡的影響[J];第三軍醫(yī)大學學報;2014年11期

2 李祥柱;張鵬;韓曉鳳;李美玲;夏飛;郭風勁;;IRE1α重組腺病毒載體對ATDC5軟骨干細胞增殖及凋亡的影響[J];解放軍醫(yī)學雜志;2013年08期

3 韓曉鳳;張鵬;李美玲;夏飛;郭風勁;;攜人ATF6重組腺病毒載體的構建及對C28I2細胞增殖及凋亡的影響[J];醫(yī)學分子生物學雜志;2013年04期

4 柳童斐;宋保亮;;膽固醇合成途徑的負反饋調控機制[J];中國細胞生物學學報;2013年04期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 楊嬌;唐霓;孫航;劉杞;鄧健川;;重組腺病毒Ad-mALR和Ad-hALR的構建及其對棕櫚酸(PA)誘導的L02細胞凋亡的影響[J];解放軍醫(yī)學雜志;2016年07期

2 李寧;劉鑫;曲正祥;劉通;杜宇;高玉鵬;閔育娜;;苜草素對蛋雞膽固醇代謝的影響及其基因調控機制[J];動物營養(yǎng)學報;2016年05期

3 鄧莉;伍志盟;胡勤;郭風勁;;SCAP重組腺病毒對ATDC5細胞增殖和凋亡的影響[J];第三軍醫(yī)大學學報;2016年14期

4 韓曉鳳;李美玲;夏飛;張鵬;郭風勁;;腺病毒介導人ATF6基因修飾對體外細胞增殖凋亡的實驗研究[J];重慶醫(yī)科大學學報;2015年10期

5 葉元土;蔡春芳;許凡;董嬌嬌;張寶彤;蕭培珍;;灌喂氧化魚油使草魚腸道黏膜膽固醇膽汁酸合成基因通路表達上調[J];水生生物學報;2015年01期

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 張瑩鈺;宋保亮;;飲食膽固醇吸收的研究進展[J];生物物理學報;2012年07期

2 劉麗麗;郭啟煜;;未折疊蛋白反應的信號通路[J];中國醫(yī)藥生物技術;2009年06期

3 姚鳳華;何婭妮;詹俊;冀志勇;;內質網(wǎng)應激在急性缺血性大鼠腎損傷中的作用[J];第三軍醫(yī)大學學報;2009年11期

4 吳小瑋;何婭妮;丁涵露;王惠明;李開龍;楊聚榮;詹俊;張建國;;慢性腎病患者腎小管上皮細胞內質網(wǎng)應激與細胞凋亡的關系[J];第三軍醫(yī)大學學報;2008年11期

5 賴桂華;邱小忠;余磊;焦培峰;陸云濤;歐陽鈞;;氧化應激對C2C12成肌細胞增殖與凋亡的影響[J];中國組織工程研究與臨床康復;2007年02期

6 邱小忠,余磊,廖華,張黎聲,秦建強,楊俊,歐陽鈞;活性氧促使L6成肌細胞的分化[J];第一軍醫(yī)大學學報;2005年11期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 程雁,張詠南;構建雙重組腺病毒的新載體[J];國外醫(yī)學.預防.診斷.治療用生物制品分冊;2000年03期

2 黃盛東,張寶仁,梅舉,李白翎;人血管內皮生長因子-D的重組腺病毒制備與鑒定[J];解放軍醫(yī)學雜志;2000年05期

3 趙小東,韓峰,王艷,楊貴賓,應革,林勇平,王璇,吳淑華;表達流感病毒神經(jīng)氨酸酶基因的重組腺病毒的構建[J];中國病毒學;2003年03期

4 陸巍,鄭樹;聚合酶鏈反應檢測重組腺病毒方法的建立及評價[J];中華檢驗醫(yī)學雜志;2004年12期

5 張梅,何金生,朱梅,汪紅俊;重組腺病毒方法的改建[J];中國公共衛(wèi)生;2005年01期

6 孟舒;曹江;黃盛東;秦永文;;人血管生成素相關蛋白2重組腺病毒制備[J];中國實用內科雜志;2006年04期

7 吳小兵,董小巖,伍志堅,屈建國,侯云德;一種快速高效分離和純化重組腺病毒伴隨病毒載體的方法[J];科學通報;2000年19期

8 何金生,王健偉,溫樂英,洪濤;一種快速構建重組腺病毒的簡便方法[J];安徽醫(yī)科大學學報;2002年01期

9 劉靜杰;攜帶編碼人血管內皮生長因子165的重組腺病毒能促進傷口愈合[J];中國危重病急救醫(yī)學;2002年07期

10 趙軍,馮躍,孟榮貴,黃盛東;雙自殺基因融合基因重組腺病毒的制備與鑒定[J];第二軍醫(yī)大學學報;2003年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 梁紹燕;金先慶;羅慶;;結締組織生長因子的克隆及其重組腺病毒的構建[A];中國西南地區(qū)第九屆小兒科學術會議論文匯編[C];2008年

2 熊俊;孫擎;胡凱猛;冀凱宏;劉厚奇;;重組腺病毒pAdEasy-1/pAdTrack-CMV-hSnaill質粒的構建[A];中國解剖學會第十一屆全國組織學與胚胎學青年學術研討會論文匯編[C];2009年

3 張春紅;黃忠;阮良基;曹漢威;;含豬生長激素基因的重組腺病毒的構建[A];第一屆中國養(yǎng)豬生產(chǎn)和疾病控制技術大會——2005中國畜牧獸醫(yī)學會學術年會論文集[C];2005年

4 李玉峰;姜平;;豬繁殖與呼吸綜合征病毒GP5蛋白重組腺病毒的構建與鑒定[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會成立20周年慶典暨第十次學術研討會論文集（上）[C];2003年

5 李巧;王志剛;冉海濤;鐘世根;李興升;;載重組腺病毒Ad-EGFP/HIF-1α的超聲造影劑的制備以及超聲輻照對腺病毒活性的影響[A];中國超聲醫(yī)學工程學會第八屆全國腹部超聲學術會議論文匯編[C];2010年

6 胡波;王芳;;兔病毒性出血癥病毒結構基因在重組腺病毒系統(tǒng)中的表達和鑒定[A];2007中國兔文化節(jié)“康大杯”兔業(yè)優(yōu)秀科技論文、科普作品集[C];2007年

7 靳繼德;劉鋮;哈小琴;李元敏;吳祖澤;;攜帶人肝細胞生長因子基因的重組腺病毒對大鼠局灶性腦缺血治療的實驗研究[A];全面建設小康社會：中國科技工作者的歷史責任——中國科協(xié)2003年學術年會論文集（上）[C];2003年

8 祝成亮;魯敏翔;胡漢寧;劉芳;周新;;熱休克蛋白72重組腺病毒包裝及其對細胞凋亡的影響[A];第四屆全國血脂分析與臨床學術研討會暨第九屆全國脂蛋白學術會議論文匯編[C];2008年

9 郭浩;彭毅志;辛海明;;小鼠CCR7基因重組腺病毒的構建與鑒定[A];第八屆西南五省一市燒傷整形學術會議暨貴州省醫(yī)學會燒傷整形分會2010年學術年會論文匯編[C];2010年

10 徐琳;陳杰;麻曉峰;高下;;構建人pAdeasy-NT3-DsRed2融合基因重組腺病毒[A];中華醫(yī)學會第十次全國耳鼻咽喉-頭頸外科學術會議論文匯編（下）[C];2007年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 吳一福;重組腺病毒核糖核酸酶載體問世[N];中國醫(yī)藥報;2007年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊國華;重組腺病毒Ad-Apoptin-hTERT-E1a對結腸癌抑制作用的實驗研究[D];吉林大學;2015年

2 李凱;漢灘病毒多組分新型重組腺病毒的制備及免疫學特性研究[D];第四軍醫(yī)大學;2013年

3 陳漉;特異性抗腫瘤重組腺病毒抑癌作用研究[D];吉林大學;2009年

4 李文輝;基于重組腺病毒的狂犬病毒基因工程疫苗研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2001年

5 陶陶;重組腺病毒HIF-1α基因治療腦缺血的實驗研究[D];重慶醫(yī)科大學;2005年

6 馬臻;HBV X-HCV C融合基因重組腺病毒的構建及對肝細胞生物學行為的影響[D];重慶醫(yī)科大學;2006年

7 周繼章;雞源鸚鵡熱衣原體主要外膜蛋白（MOMP）基因重組腺病毒活載體疫苗研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2006年

8 王瀾;重組腺病毒介導人野生型p53、GM-CSF和B7-1基因對惡性腫瘤生物治療的臨床前研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2004年

9 梁蔚芳;聚乙二醇化干擾素α-2a與干擾素α-2a在體內和體外的抗乙型肝炎病毒活性研究[D];第一軍醫(yī)大學;2007年

10 張林;SCL轉基因聯(lián)合SCF促Cajal間質細胞恢復的在體實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學;2007年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 薛曉娟;表達水泡性口炎病毒G蛋白重組腺病毒的構建與免疫原性分析[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2015年

2 許晗;共表達PCV2 Cap蛋白和免疫增強因子InvC重組腺病毒甚因工程疫苗的研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2015年

3 羅麗蕓;hAIF-1重組腺病毒對A549細胞增殖和遷移的影響[D];南京師范大學;2015年

4 孫慧玲;基于IGF2基因組印跡丟失的5型重組腺病毒靶向治療結直腸癌的實驗研究[D];南京師范大學;2015年

5 夏迪;重組腺病毒Ad-Dectin-1轉染小鼠肺泡巨噬細胞及其在煙曲霉感染中的作用[D];南京大學;2015年

6 舒燕;Ad-pre-microRNA-193b重組腺病毒的構建及其抗白血病效應探討[D];重慶醫(yī)科大學;2015年

7 劉凱;乙腦E基因和豬白細胞介素6基因重組腺病毒的構建與初步免疫研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2013年

8 唐丹;嗜肝細胞重組腺病毒基因治療載體的構建[D];重慶醫(yī)科大學;2010年

9 焦月盈;表達人呼吸道合胞病毒結構蛋白的重組腺病毒及桿狀病毒的構建與鑒定[D];北京交通大學;2011年

10 邱亞;重組腺病毒rhAdEasy-nm23-H1的構建與鑒定及體外表達的實驗研究[D];昆明醫(yī)學院;2006年

，

本文編號：744483