本文關鍵詞：絲素蛋白復合脫鈣骨基質修復動物骨缺損模型的試驗研究

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【摘要】：目的：在大鼠體內骨缺損模型中,對自制不同比例絲素蛋白復合同種異體脫鈣骨基質(demineralized bone matrix, DBM)骨修復情況進行評價分析材料與方法：1.材料制備：①絲素蛋白制備：將家蠶絲脫去絲膠蛋白溶解為溶液凍干；②DBM的制備：將SD大鼠尺橈骨及股骨干的皮質骨經深低溫后制成顆粒狀；③復合材料的制備：將絲素蛋白與DBM以不同濃度比例共混得到實驗材料(DBM含量：0%、10%、20%、40%、80%)。2.實驗方法：①分組情況：隨機抽取72只8周齡雄性SD大鼠,分別編入不同濃度比例的絲素蛋白與脫鈣骨基質復合材料中,A組(不含DBM)、B組(含10%DBM)、C組(含20%DBM)、D組(含40%DBM)、E組(含80%DBM),F組(空白對照),每組12只；②缺損模型制作：在大鼠橈骨中段應用線鋸,制作5mm大段骨缺損模型；③材料植入：將各組材料制作成長約5mm寬約1.5mm的長方體植入到大鼠缺損模型中；④檢測方法：在手術后二、四、八周,行X線片檢測；攝片后,將模型缺損區(qū)取出進行大體觀察,HE染色、Masson染色、兩種免疫組化(Osteocalcin,Collagen I)并進行粘連程度、影像學及免疫組化評分以評估骨缺損愈合情況,利用非參數(shù)秩和檢驗統(tǒng)計方法來分析各組間骨形成的差異性。結果：1.大體觀察后應用Hiteheock粘連程度分級評分并做統(tǒng)計分析：在相同時間點各組間粘連評分比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),不同時間點各組組內比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.應用Lane-sandhu X線評分并進行統(tǒng)計分析：各時間點D、E組評分較其余組評分高(P0.01),且兩組間無明顯差異(P0.05)。3.對兩種免疫組化(Osteocalci、Collagen I)進行評分并統(tǒng)計分析,經過本實驗觀察,骨鈣素在四周時陽性反應明顯,且D、E組陽性顆粒面積與A、B、C、F組有明顯差異(P0.01)。經過本實驗觀察,Ⅰ型膠原在四周及八周陽性反應較明顯,D、E組陽性面積較其余組有明顯差異,且在四周時,D組優(yōu)于E組(P0.01),而八周時兩者無統(tǒng)計學差異(P0.05)。結論：1.絲素蛋白復合脫鈣骨基質修復材料有較好的成骨能力。2.在一定范圍內,絲素蛋白復合脫鈣骨基質修復材料隨脫鈣骨基質比例的增加,成骨性能會逐漸增強。3.絲素蛋白與脫鈣骨基質比例為6：4(40%DBM)時成骨性能較好,再增加脫鈣骨基質的比例并不能提高其成骨性能。
【關鍵詞】：絲素蛋白 脫鈣骨基質 骨缺損 復合材料
【學位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R687;R318.08;R-332
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 中英文縮略詞匯對照10-11
• 前言11-12
• 1. 材料與方法12-14
• 1.1 主要儀器12
• 1.2 主要試劑12-13
• 1.3 實驗動物13
• 1.4 材料制備13-14
• 1.4.1 絲素蛋白制備13
• 1.4.2 DBM制備13-14
• 1.4.3 絲素蛋白復合DBM骨修復材料的制備14
• 2 骨缺損模型的建立與分組14-15
• 2.1 實驗分組14-15
• 2.2 手術操作15
• 3. 檢測指標15-20
• 3.1 大體觀察15-16
• 3.2 X線檢測16
• 3.3 組織學檢測16-19
• 3.3.1 HE檢測17
• 3.3.2 改良Masson三色染色17-18
• 3.3.3 免疫組化檢測(免疫酶細胞技術)18-19
• 3.4 統(tǒng)計學分析19-20
• 4 結果20-32
• 4.1 大體觀察結果及分析20-21
• 4.2 X線觀察結果與分析21-23
• 4.3 組織學觀察23-32
• 4.3.1 HE染色結果觀察23-25
• 4.3.2 Masson染色結果觀察25-27
• 4.3.3 Osteocalci免疫組化結果觀察及統(tǒng)計分析27-29
• 4.3.4 Collagen Ⅰ免疫組化結果觀察29-32
• 5. 討論32-35
• 5.1 臨界缺損模型的建立33
• 5.2 絲素蛋白復合脫鈣骨基質骨修復材料33-34
• 5.3 實驗結果的分析34-35
• 6. 結論35-36
• 參考文獻36-41
• 文獻綜述41-49
• 參考文獻44-49
• 攻讀學位期間發(fā)表文章情況49-50
• 致謝50

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 鞠剛;徐衛(wèi)袁;張亞;張興祥;嚴飛;沙衛(wèi)平;;多孔絲素蛋白/羥基磷灰石復合脂肪間充質干細胞修復兔關節(jié)軟骨及軟骨下骨缺損[J];中國組織工程研究與臨床康復;2011年29期

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本文編號：731931