本文關(guān)鍵詞：弓形蟲表面抗原SAG1基因自殺性DNA疫苗的構(gòu)建及免疫原性檢測

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【摘要】：目的構(gòu)建表達弓形蟲表面抗原SAG1的自殺性DNA疫苗pDREP-SAG1并檢測其免疫原性。方法以弓形蟲RH株基因組DNA為模板,PCR擴增SAG1基因(GenBank No.HM776940.1),克隆至甲病毒復(fù)制子載體pDREP-eGFP中替換原有的eGFP基因,菌液PCR、雙酶切及測序鑒定重組質(zhì)粒。重組的自殺性DNA疫苗pDREP-SAG1經(jīng)股四頭肌注射并聯(lián)合瞬時電穿孔免疫BALB/c小鼠,同時以原質(zhì)粒pDREP-eGFP作為對照組,間隔3周后以相同條件再免疫1次,收集小鼠血清,以弓形蟲裂解抗原Western blotting檢測其誘導(dǎo)產(chǎn)生的特異性抗體。結(jié)果從弓形蟲基因組中PCR擴增得到1 011bp長度的SAG1基因,成功構(gòu)建重組質(zhì)粒pDREP-SAG1。Western blotting結(jié)果顯示,重組質(zhì)粒免疫的小鼠血清能特異性地識別蟲體抗原中的SAG1抗原。結(jié)論成功構(gòu)建了弓形蟲自殺性DNA疫苗pDREP-SAG1,能誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生特異性的抗體,具有免疫原性。
【作者單位】： 溫州醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院寄生蟲學(xué)教研室;溫州醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院/附屬口腔醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 弓形蟲 SAG 自殺性DNA疫苗
【基金】：浙江省科技廳公益技術(shù)研究社會發(fā)展項目(No.2014C33161) 溫州市科技局公益項目(No.Y20140665) 浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新活動計劃暨新苗人才計劃項目(No.2015R413061)聯(lián)合資助~~
【分類號】：R382.5
【正文快照】： 浙江省科技廳公益技術(shù)研究社會發(fā)展項目(No.2014C33161)、溫州市科技局公益項目(No.Y20140665)和浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新活動計劃暨新苗人才計劃項目(No.2015R413061)聯(lián)合資助剛地弓形蟲(Toxoplasma gondii)是一種重要的機會性致病原蟲,廣泛寄生于人和多種動物的有核細胞內(nèi),可引

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本文編號：711775