本文關(guān)鍵詞：Sabin株脊髓灰質(zhì)炎病毒純化液蛋白成分分析

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【摘要】：目的對本公司研發(fā)的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株脊髓灰質(zhì)炎病毒純化液進行蛋白成分分析及鑒定。方法按照疫苗生產(chǎn)工藝,應(yīng)用NBS籃式生物反應(yīng)器生產(chǎn)單價脊髓灰質(zhì)炎病毒原液,經(jīng)超濾濃縮及分子篩和陰離子交換兩步柱層析純化方法,收集并滅活蛋白峰。透射電鏡下觀察病毒形態(tài)及大小;ELISA方法檢測宿主細胞蛋白(host cell protein,HCP)及殘留牛血清白蛋白含量;HPLC法分析單價滅活病毒純化液純度;液相色譜(liquid chromatography,LC)與電噴霧電離質(zhì)譜(electrospray ionization-mass spectrometry,ESI-MS)相結(jié)合的技術(shù)鑒定樣品中所含蛋白成分。結(jié)果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株脊髓灰質(zhì)炎病毒純化液中可見球形病毒顆粒,直徑25~30 nm;HCP、殘余牛血清白蛋白含量分別低于50 ng/ml、2.5μg/ml;純度大于95%;單價脊髓灰質(zhì)炎病毒樣品中含有相應(yīng)血清型的脊髓灰質(zhì)炎病毒基因組編碼蛋白,且相應(yīng)病毒蛋白成分數(shù)據(jù)庫匹配相對分值在所含蛋白組分中均最高。結(jié)論Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株脊髓灰質(zhì)炎病毒液經(jīng)純化后,有效去除了雜質(zhì)蛋白保留了病毒蛋白組分,單價病毒純化液病毒蛋白成分明確,純度較高,為后續(xù)該疫苗的研發(fā)與生產(chǎn)提供了參考。
【作者單位】： 北京天壇生物制品股份有限公司;
【關(guān)鍵詞】： 脊髓灰質(zhì)炎病毒 純化 蛋白成分
【基金】：國家科技部“重大新藥創(chuàng)新”專項(2013ZX09402302)
【分類號】：R392
【正文快照】： 脊髓灰質(zhì)炎(以下簡稱脊灰)是由脊灰病毒感染引起的、以肢體麻痹為主的急性腸道傳染性疾病,兒童為主要易感人群。目前控制與消滅脊灰最重要的是接種有效的脊灰疫苗。國內(nèi)外應(yīng)用的脊灰疫苗有兩種:口服脊灰減毒活疫苗(oral poliovirus vaccine, OPV)和滅活脊灰疫苗(inactivated

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 林盛;;首次人工合成脊髓灰質(zhì)炎病毒[J];國外醫(yī)學(xué)情報;1982年08期

2 孔健，徐愛強，董春明，劉萍，，迮文遠;應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)鑒定脊髓灰質(zhì)炎病毒[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;1994年11期

3 丁昌慧,邵榮標(biāo),錢績虎,嚴建國,湯權(quán),劉玲,吳巨飛;外環(huán)境中脊髓灰質(zhì)炎病毒分離的實驗研究[J];疾病監(jiān)測;2000年08期

4 丁昌慧,邵榮標(biāo),錢R慊

本文編號：694299