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幽門螺桿菌hspA-ureB融合基因在乳酸菌中的表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2017-08-11 16:17

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【摘要】:目的構(gòu)建融合表達(dá)幽門螺桿菌(H.pylori)抗原Ure B與Hsp A的乳酸乳球菌(L.lactis)菌株,為H.pylori感染的疫苗和免疫診斷研究奠定基礎(chǔ)。方法從前期構(gòu)建的hsp A-ure B融合基因克隆菌株E.coli TB1/p MAL-c2x-hsp Aure B中提取質(zhì)粒,用PCR方法從質(zhì)粒中擴(kuò)增hsp A-ure B基因,將擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)限制性酶切后與表達(dá)載體p NZ8110連接,用于轉(zhuǎn)化E.coli MC1061菌株,從轉(zhuǎn)化子中提取重組質(zhì)粒p NZ8110-hsp A-ure B,用電穿孔法將其轉(zhuǎn)入L.lactis NZ3900菌株中,用乳鏈菌素誘導(dǎo)hsp A-ure B表達(dá),應(yīng)用PAGE分析表達(dá)產(chǎn)物。結(jié)果 hsp A-ure B基因的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物長度為2 085 bp,酶切、PCR和測(cè)序鑒定結(jié)果均顯示L.lactis表達(dá)系統(tǒng)構(gòu)建正確,PAGE分析未能確定融合基因表達(dá)條帶。結(jié)論首次以L.lactis為宿主菌成功構(gòu)建H.pylori 2種抗原的融合表達(dá)系統(tǒng),研究發(fā)現(xiàn)對(duì)H.pylori口服疫苗和診斷技術(shù)發(fā)展具有重要意義。
【作者單位】: 鄭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院流行病與統(tǒng)計(jì)學(xué)教研室;河南省分子診斷與醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)協(xié)同創(chuàng)新中心(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院);河南省分子醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】乳酸乳球菌 熱休克蛋白 尿素酶 幽門螺桿菌 融合表達(dá)
【基金】:中國博士后科學(xué)基金特別資助項(xiàng)目(200801273) 河南省分子診斷與醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)協(xié)同創(chuàng)新中心(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院)資助項(xiàng)目(XTCX-2015-ZD2)
【分類號(hào)】:R3416;R392
【正文快照】: 幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染可以引起胃炎、消化性潰瘍和胃癌等多種疾病[1]。由于基于抗生素的三聯(lián)療法不能預(yù)防重復(fù)感染,且因細(xì)菌抗藥性升高致療效下降,因此疫苗研究在H.pylori感染防治中成為研究熱點(diǎn)[2-4]。H.pylori感染的免疫診斷因具有簡便快捷和損傷較

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 易艷軍;許麗芳;周支香;楊秋林;;弓形蟲P30基因-乳酸乳球菌重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其表達(dá)[J];中國病原生物學(xué)雜志;2012年06期

2 李充璧,閆寶山,李曉晨,孫克菲,王春香,周明海;大鼠Endostatin在乳酸乳球菌中的克隆與表達(dá)大鼠Endostatin在乳酸乳球菌中的克隆與表達(dá)[J];中國生物制品學(xué)雜志;2004年06期

3 龔芳紅;賀松;張德純;劉明方;郭亞楠;;幽門螺桿菌熱休克蛋白A在乳酸乳球菌中的表達(dá)及免疫學(xué)活性分析[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2010年02期

4 尹軍霞;沈國娟;謝亞芳;;分離自酸菜汁的乳酸乳球菌體外去除膽固醇特性[J];食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào);2009年06期

5 陸春雨;;用共表達(dá)抗原和細(xì)胞因子的乳酸乳球菌重組株經(jīng)粘膜途徑免疫誘生小鼠IL-2和IL-6[J];國外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));1999年06期

6 ;[J];;年期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 龔芳紅;賀松;張德純;劉明方;郭亞楠;;幽門螺桿菌熱休克蛋白A在乳酸乳球菌中的表達(dá)及免疫學(xué)活性分析[A];重慶微生物學(xué)會(huì)第九屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2009年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 易艷軍;弓形蟲P30蛋白在乳酸乳球菌中的表達(dá)及其誘導(dǎo)小鼠免疫應(yīng)答的研究[D];南華大學(xué);2013年

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本文編號(hào):657058

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