骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞周期同步化的方法及對向神經(jīng)細(xì)胞分化的影響
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【摘要】:目的分析不同處理?xiàng)l件下細(xì)胞同步化于G0/G1時期的效果以得到最佳的同步化條件,并研究同步化對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)在堿性成纖維細(xì)胞因子(b FGF)的作用下分化為神經(jīng)細(xì)胞的影響。方法分離培養(yǎng)成年大鼠BMSCs,5%、1%、0.5%、0.1%、0胎牛血清(FBS)分別處理24 h、48 h。PI染色后經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期各時相細(xì)胞所占比例,與正常培養(yǎng)條件(10%FBS)處理下對比。得到最佳處理?xiàng)l件后,b FGF處理3 d、7 d,免疫熒光細(xì)胞化學(xué)方法檢測Nestin和Tuj-1的表達(dá)。結(jié)果成年大鼠BMSCs原代提取,經(jīng)傳代后,細(xì)胞形態(tài)為長梭形。不同處理?xiàng)l件下G1/G0期細(xì)胞比例均高于正常培養(yǎng)條件,1%FBS處理48 h時G1/G0期細(xì)胞比例為(94.274±0.468)%,達(dá)最高峰(F=39.91,P0.001)。b FGF誘導(dǎo)3 d后,細(xì)胞周期同步化后的Nestin+細(xì)胞數(shù)顯著高于未同步化的細(xì)胞數(shù)[(80.3±2.4)%vs.(12.1±1.5)%](F=28.25,P0.001);b FGF誘導(dǎo)7 d后,同步化后的Tuj-1+細(xì)胞數(shù)顯著高于未同步化的細(xì)胞數(shù)[(74.8±3.2)%vs.(19.3±2.5)%](F=17.95,P0.001)。結(jié)論 1%FBS處理48 h是將BMSCs同步化于G0/G1期的最佳條件。細(xì)胞周期同步化于G0/G1期能夠提高BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化的比例。
【作者單位】: 北京航空航天大學(xué)生物與醫(yī)學(xué)工程學(xué)院;首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 細(xì)胞周期 同步化 血清饑餓法 神經(jīng)分化 大鼠
【基金】:國家“863”計(jì)劃項(xiàng)目(No.2012AA020206) 國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(No.31271037);國家自然科學(xué)基金國際合作與交流項(xiàng)目(No.31320103903);國家自然科學(xué)基金委員會資助項(xiàng)目(No.31130022) “十二五”國家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(No.2012BAI17B04) 高等學(xué)校全國優(yōu)秀博士學(xué)位論文作者專項(xiàng)資金資助項(xiàng)目(No.201356) 國家國際科技合作專項(xiàng)項(xiàng)目(No.2014DFA30640)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: [本文著錄格式]李曼麗,趙文,高鈺丹,等.骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞周期同步化的方法及對向神經(jīng)細(xì)胞分化的影響[J].中國康復(fù)理論與實(shí)踐,2016,22(12):1399-1403.CITED AS:Li ML,Zhao W,Gao YD,et al.Cell cycle synchronization methods of bone marrow mesenchymal stem cells and i
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,本文編號:653606
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