本文關(guān)鍵詞：人TNF-α點(diǎn)突變蛋白的制備及免疫原性分析

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【摘要】：腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)在人體內(nèi)的毒副作用可以通過(guò)定點(diǎn)突變的方式得以改善。本研究結(jié)合公開(kāi)文獻(xiàn)及空間結(jié)構(gòu)展示軟件(discovery studio 3.5)對(duì)人TNF-α進(jìn)行了的點(diǎn)突變實(shí)驗(yàn)。運(yùn)用重疊PCR方法成功引入S95F、Y115F、Y119W和S147Y四個(gè)單點(diǎn)突變。經(jīng)原核表達(dá)及鎳柱親和層析純化后得到人TNF-α及其點(diǎn)突變蛋白。通過(guò)測(cè)定人TNF-α及其點(diǎn)突變蛋白的生物活性發(fā)現(xiàn)三種點(diǎn)突變(S95F,Y115F,Y119W)都顯著降低人TNF-α對(duì)L929細(xì)胞的殺傷率。小鼠免疫實(shí)驗(yàn)證明4個(gè)突變蛋白均可刺激機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)人TNF-α的抗體效應(yīng)。
【作者單位】： 上海交通大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院微生物代謝國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： TNF-α 點(diǎn)突變 L細(xì)胞 免疫原性
【基金】：國(guó)家科技重大專項(xiàng)(2014ZX09101043-002)基金資助
【分類(lèi)號(hào)】：R392
【正文快照】： Preparation and Research for Immunogenicity of Point Mutation Protein ofHuman Tumor Necrosis Factor alphaZeng Pan Zhang Li Deng Li Li Rongxiu*State Key Laboratory of Microbial Metabolism,School of Life SciencesBiotechnology,Shanghai Jiao Tong University

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本文編號(hào)：639342