本文關(guān)鍵詞：PTEN在骨形態(tài)發(fā)生蛋白9誘導(dǎo)小鼠胚胎成纖細(xì)胞骨向分化中的作用

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【摘要】：目的研究PTEN對(duì)骨形態(tài)發(fā)生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)誘導(dǎo)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)成骨分化的影響,并分析PTEN調(diào)節(jié)BMP9功能的可能機(jī)制。方法采用定量PCR檢測(cè)PTEN在間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)中的表達(dá),分析在MEFs中BMP9對(duì)PTEN表達(dá)的影響。采用組織化學(xué)染色法檢測(cè)堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,PCR檢測(cè)OPN和OCN的表達(dá)水平,茜素紅染色檢測(cè)鈣鹽沉積,分析PTEN對(duì)BMP9誘導(dǎo)MEFs成骨分化的影響;利用熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒和蛋白印跡等方法分析PTEN對(duì)骨形態(tài)發(fā)生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)/Smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響。結(jié)果 PTEN在幾種常見MSCs中均有表達(dá);BMP9在MEFs中明顯抑制PTEN的表達(dá)。抑制PTEN能促進(jìn)BMP9誘導(dǎo)MEFs的ALP活性增加,但過(guò)表達(dá)PTEN對(duì)BMP9誘導(dǎo)MEFs的ALP活性有明顯抑制作用。抑制PTEN明顯促進(jìn)BMP9在MEFs細(xì)胞中誘導(dǎo)的OCN表達(dá),并增強(qiáng)鈣鹽沉積。報(bào)告質(zhì)粒分析結(jié)果顯示,抑制PTEN能明顯增強(qiáng)BMPR-Smad報(bào)告質(zhì)粒的轉(zhuǎn)錄活性,并增加Smad1/5/8的磷酸化水平。結(jié)論下調(diào)PTEN表達(dá)可能是BMP9誘導(dǎo)MEFs成骨分化重要途徑之一,其機(jī)制可能與促進(jìn)BMPs/Smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)藥理學(xué)教研室重慶市生物化學(xué)與分子藥理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 骨形態(tài)發(fā)生蛋白 PTEN 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 成骨分化 BMPs/Smads
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81372120)~~
【分類號(hào)】：R322.71
【正文快照】： 重慶醫(yī)科大學(xué)藥理學(xué)教研室,重慶市生物化學(xué)與分子藥理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室)間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)屬于多能干細(xì)胞,可被定向誘導(dǎo)分化為脂肪細(xì)胞、肌細(xì)胞、成骨細(xì)胞及軟骨細(xì)胞等。MSCs被認(rèn)為是骨組織工程的理想種子細(xì)胞之一,在臨床治療骨缺損及骨不連接等疾病中有

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