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缺氧模型和多因素模型構(gòu)建結(jié)核休眠菌模型比較研究

發(fā)布時間:2017-07-31 06:06

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【摘要】:目的比較缺氧模型及多因素模型兩種結(jié)核休眠菌建模方法的優(yōu)劣。方法利用缺氧因素構(gòu)建缺氧模型;利用低氧(5%O2)、高CO2(10%CO2)、弱酸(pH 5.0)及營養(yǎng)缺乏(10%7H9液體培養(yǎng)基)多種因素構(gòu)建多因素模型。分別在第20d、30d時取樣,用金胺O-尼羅紅染色法染色,在共聚焦顯微鏡下觀察結(jié)核菌脂質(zhì)聚集及失去抗酸性的情況;用電鏡觀察結(jié)核菌細胞壁增厚情況;并檢測其對利福平的耐藥率。在建模30d時,將等量的兩種模型分別轉(zhuǎn)入新鮮7H9液體培養(yǎng)基中,觀察并比較其復(fù)蘇情況。結(jié)果建模20d時,兩模型組細菌均出現(xiàn)脂質(zhì)聚集及失去抗酸性,無明顯差異。兩模型組細菌均未出現(xiàn)明顯細胞壁增厚。建模30d時,多因素模型組細菌幾乎都表現(xiàn)出脂質(zhì)聚集及失去抗酸性,而缺氧模型組仍有部分細菌未表現(xiàn)出脂質(zhì)聚集及失去抗酸性。同時,多因素模型組在建模30d還出現(xiàn)了細胞壁增厚的細菌,缺氧模型組則無明顯改變。多因素模型組細菌對利福平的耐藥率明顯高于缺氧模型組,且多因素模型組細菌復(fù)蘇的菌量遠小于缺氧模型組。結(jié)論多因素模型較缺氧模型能更快誘導(dǎo)結(jié)核菌進入休眠狀態(tài),且誘導(dǎo)出的結(jié)核休眠菌狀態(tài)更穩(wěn)定。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院第一分院;
【關(guān)鍵詞】結(jié)核休眠菌 缺氧模型 多因素模型 比較
【基金】:國家“十二五”重大專項課題(No.2012ZX10003009) 國家臨床重點?茖m椊(jīng)費(No.2012-649)聯(lián)合資助~~
【分類號】:R378.911
【正文快照】: 病程遷延,易復(fù)發(fā),且多為內(nèi)源性復(fù)發(fā),是結(jié)核病難以攻克的難題,而結(jié)核休眠菌是其中的關(guān)鍵因素。結(jié)核菌是胞內(nèi)寄生菌,機體免疫細胞吞噬結(jié)核菌后形成肉芽腫,將結(jié)核菌局限。結(jié)核菌在肉芽腫內(nèi)處于缺氧、酸性以及營養(yǎng)缺乏等不利環(huán)境中,發(fā)生染色體復(fù)制幾乎停止,代謝降低,細胞壁增厚,變

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