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LHA-DVC Orexin-A通路構(gòu)成及對胃牽張敏感神經(jīng)元放電活動和胃運動調(diào)控研究

發(fā)布時間:2017-07-29 14:24

  本文關(guān)鍵詞:LHA-DVC Orexin-A通路構(gòu)成及對胃牽張敏感神經(jīng)元放電活動和胃運動調(diào)控研究


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【摘要】:目的:Orexin-A作為一種新型神經(jīng)肽,具有廣泛的生理作用,可調(diào)節(jié)攝食、能量代謝、睡眠-覺醒及胃腸運動等生理活動,但orexin-A對胃運動調(diào)控機制還未明確。本實驗擬通過觀察orexin-A對大鼠迷走神經(jīng)復(fù)合體(DVC)胃牽張敏感神經(jīng)元(GD)放電活動的影響,以及下丘腦外側(cè)區(qū)(LHA)對其調(diào)控作用,并通過逆行追蹤結(jié)合免疫組化實驗進一步闡述LHA-DVC間可能存在orexin-A神經(jīng)及功能通路。方法:逆行追蹤技術(shù)結(jié)合熒光免疫組化染色,觀察LHA-DVC間orexin-A神經(jīng)通路的構(gòu)成;采用細胞外放電記錄,觀察DVC微量注射orexin-A對GD放電活動的影響及可能機制;通過在體胃運動研究,觀察DVC微量注射orexin-A對清醒自由活動大鼠胃收縮幅度和頻率的影響,以及對大鼠胃液及胃酸分泌的影響及機制。結(jié)果:逆行追蹤結(jié)合免疫熒光染色研究發(fā)現(xiàn),LHA內(nèi)有orexin-A/熒光金(FG)雙標神經(jīng)元;電生理實驗顯示,DVC內(nèi)共記錄到96個GD敏感神經(jīng)元,其中58個為GD-E神經(jīng)元,38個為GD-I神經(jīng)元。DVC微量注射orexin-A,有36個GD-E神經(jīng)元放電頻率明顯增強(P0.01),而24個GD-I神經(jīng)元放電頻率明顯減弱(P0.01);大鼠DVC內(nèi)預(yù)先微量注射orexin-A選擇性受體拮抗劑SB334867,orexin-A對GD-E神經(jīng)元放電興奮效應(yīng)可被完全阻斷(P0.05),同樣,對GD-I神經(jīng)元放電抑制效應(yīng)也可被完全阻斷(P0.05)。電刺激LHA,在DVC記錄到的36個orexin-A敏感性GD-E神經(jīng)元中有24個放電頻率顯著增加(P0.05);而24個orexin-A敏感性GD-I神經(jīng)元中16個放電頻率也增加(P0.05)。但預(yù)先DVC內(nèi)注射SB334867,再電刺激LHA,GD-E神經(jīng)元放電頻率較前明顯下降(P0.01),GD-I神經(jīng)元放電頻率也顯著降低(P0.05)。在體胃運動研究結(jié)果顯示,DVC微量注射orexin-A,大鼠胃收縮幅度以及收縮頻率明顯升高,且呈明顯劑量依賴關(guān)系(P0.05)。SB334867可顯著阻斷orexin-A對促胃運動效應(yīng)(P0.05)。電刺激LHA,大鼠胃運動顯著增強(P0.01);DVC微量注射orexin-A,大鼠胃液及胃酸分泌且呈劑量依賴性增加(P0.05)。結(jié)論:Orexin-A可影響大鼠胃牽張敏感神經(jīng)元放電活動,以及胃運動和胃酸分泌,該效應(yīng)可能通過Orexin-A受體通路調(diào)控。
【關(guān)鍵詞】:orexin-A 胃牽張敏感神經(jīng)元 LHA DVC 胃運動
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R363
【目錄】:
  • 摘要2-3
  • Abstract3-6
  • 引言6-8
  • 第一章 材料與方法8-15
  • 1.1 實驗材料8-10
  • 1.1.1 實驗動物8
  • 1.1.2 實驗儀器8
  • 1.1.3 實驗藥品8-9
  • 1.1.4 試劑配制9-10
  • 1.2 實驗方法10-14
  • 1.2.1 逆行追蹤實驗10-12
  • 1.2.2 電生理實驗12-13
  • 1.2.3 胃運動實驗13-14
  • 1.2.4 胃液及胃酸實驗14
  • 1.2.5 電刺激LHA14
  • 1.2.6 組織學(xué)檢查14
  • 1.3 統(tǒng)計學(xué)分析14-15
  • 第二章 實驗結(jié)果15-26
  • 2.1 下丘腦外側(cè)區(qū)-迷走神經(jīng)復(fù)合體orexin-A神經(jīng)纖維投射15
  • 2.2 DVC微量注射orexin-A對GD神經(jīng)元放電活動的影響15-17
  • 2.3 電刺激LHA對DVC orexin-A敏感性GD神經(jīng)元放電活動的影響17-19
  • 2.4 DVC微量注射orexin-A對大鼠胃運動的影響19-21
  • 2.5 DVC微量注射SB334867對電刺激LHA誘導(dǎo)的胃運動的影響21-24
  • 2.6 DVC微量注射orexin-A對大鼠胃液及胃酸分泌的影響24-26
  • 第三章 討論26-28
  • 結(jié)論28-29
  • 參考文獻29-33
  • 綜述33-59
  • 參考文獻45-59
  • 致謝59-60
  • 攻讀學(xué)位期間研究成果60-61

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10 周呂;袁勃;王禮建;張春s,

本文編號:589603


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