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基于Caco-2細(xì)胞的外源核酸吸收模型的建立及其吸收機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2017-07-20 10:04

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【摘要】:基于人結(jié)腸癌細(xì)胞系Caco-2細(xì)胞建立外源核酸的吸收模型,并在此模型的基礎(chǔ)上探究質(zhì)粒DNA的腸道吸收機(jī)制。在Transwell孔膜上培養(yǎng)Caco-2細(xì)胞21 d后,通過(guò)透射電子顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)、監(jiān)測(cè)培養(yǎng)期間跨膜電阻(transepithelial electrical resistance,TEER)值、測(cè)定熒光黃透過(guò)率評(píng)價(jià)細(xì)胞模型是否成功建成;通過(guò)細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)探究質(zhì)粒對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響;將質(zhì)粒DNA加入細(xì)胞模型中進(jìn)行雙向轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn),探究質(zhì)粒的腸道吸收規(guī)律;在低溫和添加特異性抑制劑條件下進(jìn)行質(zhì)粒轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn),進(jìn)一步推測(cè)質(zhì)粒的腸道吸收機(jī)制。結(jié)果表明,細(xì)胞分化形態(tài)良好、TEER值及熒光黃表觀透過(guò)系數(shù)(apparent permeability coefficient,Papp)均符合要求,細(xì)胞模型可用于轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn);質(zhì)粒對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)無(wú)顯著抑制作用,可用于轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn);隨著時(shí)間的延長(zhǎng),質(zhì)粒在模型兩方向上的轉(zhuǎn)運(yùn)均呈逐漸飽和趨勢(shì),Papp(腸腔側(cè)(apical,AP)→基底側(cè)(basolateral,BL))遠(yuǎn)大于Papp(BL→AP),提示質(zhì)粒的轉(zhuǎn)運(yùn)受到某種載體蛋白的介導(dǎo),膜介導(dǎo)的跨細(xì)胞運(yùn)輸方式可能參與其中;在低溫和添加特異性抑制劑條件下,質(zhì)粒的轉(zhuǎn)運(yùn)均受到顯著抑制,進(jìn)一步表明該過(guò)程是一個(gè)跨細(xì)胞方式的主動(dòng)運(yùn)輸過(guò)程。
【作者單位】: 中國(guó)海洋大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】Caco-細(xì)胞模型 外源核酸 吸收機(jī)制 質(zhì)粒DNA
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目(31201327;31301420) 國(guó)家自然科學(xué)基金委員會(huì)-山東省人民政府聯(lián)合資助海洋科學(xué)研究中心項(xiàng)目(U1406402) 中國(guó)博士后科學(xué)基金項(xiàng)目(2015M580609)
【分類號(hào)】:R333
【正文快照】: 引文格式:王曉倩,張艷芳,王倩,等.基于Caco-2細(xì)胞的外源核酸吸收模型的建立及其吸收機(jī)制[J].食品科學(xué),2016,37(23):236-241.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201623039.http://www.spkx.net.cnWANG Xiaoqian,ZHANG Yanfang,WANG Qian,et al.Absorption model and mechanism of exog

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本文編號(hào):567432

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