本文關(guān)鍵詞：膜周蛋白PICK1促進細胞膜上P2Y6受體表達及小膠質(zhì)細胞的吞噬功能

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【摘要】：膜周蛋白PICK1(protein interacting C-kinase-1)參與多種膜受體與膜上蛋白的運輸并影響細胞的功能。本研究旨在探索小膠質(zhì)細胞PICK1與P2Y6受體之間的相互作用是否可改變P2Y6受體在細胞膜上的表達,以及對小膠質(zhì)細胞吞噬功能的影響。采用小鼠腦內(nèi)皮層原代培養(yǎng)的小膠質(zhì)細胞進行免疫共沉淀實驗揭示,與PICK1敲除小鼠比較,野生小鼠皮層小膠質(zhì)細胞內(nèi)存在PICK1-P2Y6受體相互作用。生物素化、密度梯度離心結(jié)合蛋白質(zhì)印跡實驗證明,PICK1基因敲除小鼠的小膠質(zhì)細胞膜表面P2Y6受體表達水平降低。熒光膠珠吞噬實驗結(jié)合免疫組織化學(xué)染色顯示,PICK1基因敲除小鼠的小膠質(zhì)細胞對UDP(刺激)引起的熒光膠珠吞噬作用減弱。蛋白質(zhì)印跡實驗顯示,與野生型小鼠比較,PICK1基因敲除小鼠小膠質(zhì)細胞中的Akt-308T磷酸化水平明顯降低;使用Akt抑制劑API-2能有效抑制Akt在小膠質(zhì)細胞內(nèi)的(磷酸化)激活及UDP刺激引起的吞噬作用。上述結(jié)果表明,敲除PICK1能下調(diào)小膠質(zhì)細胞膜上P2Y6受體的表達,并降低小膠質(zhì)細胞的吞噬功能,且這一過程依賴Akt磷酸化修飾。總之,PICK1可促進P2Y6受體在細胞膜上的表達,是小膠質(zhì)細胞吞噬功能的重要調(diào)節(jié)子;敲除PICK1可下調(diào)P2Y6膜受體表達,并降低小膠質(zhì)細胞的吞噬功能。這一結(jié)果可加深對小膠質(zhì)細胞的吞噬功能及機制的認識。
【作者單位】： 嘉興學(xué)院醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)與免疫學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 膜周蛋白PICK PY受體 小膠質(zhì)細胞 吞噬
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(No.81501043) 2014年浙江省教育廳一般科研項目(No.Y201431577)資助~~
【分類號】：R392.12
【正文快照】： *聯(lián)系人Tel:0573-83643870;E-mail:zhujia0322@163.comReceived:November 26,2015;Revised:April 1,2016;Accepted:April 18,2016Supported by National Natural Science Foundation of China(No.81501043)and Project of Zhejiang Provincial Education Department(No.Y20143

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