本文關鍵詞：GM1體外誘導人臍帶血間充質干細胞分化為神經(jīng)樣細胞研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂通過體外誘導人臍帶間充質干細胞分化為神經(jīng)樣細胞并探索其最佳誘導濃度。方法取足月妊娠剖宮產(chǎn)健康胎兒的臍帶,剔除臍動脈和臍靜脈,用酶消化法獲得MSCs,貼壁培養(yǎng),采用流式細胞技術行細胞表型檢測。擴增后,取第4代細胞,分為A、B、C、D、E 5組,前4組為實驗組,E組為對照組,實驗組各組GM1濃度分別為:A組50μg/m L、B組100μg/m L、C組150μg/m L、D組200μg/m L,誘導液用L-DMEM培養(yǎng)基配制,對照組僅使用L-DMEM培養(yǎng)基。觀察5組誘導人臍帶血間質干細胞向神經(jīng)樣細胞分化的作用,每60min觀察細胞誘導前后的形態(tài),在第360min時采用免疫細胞染色法檢測膠質纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、神經(jīng)絲蛋白(neurofilaments protein H,NF-H)以及神經(jīng)元特異性標記物微管結合蛋白-2(microtubule associated protein 2,MAP-2)的表達情況,并計算陽性細胞率。結果 1大部分原代細胞在接種9h后貼壁,呈多邊形、菱形,之后變?yōu)殚L梭形,細胞開始以漩渦、放射狀生長。2P3、P5和P10代細胞表面的分子標記經(jīng)流式細胞術檢測發(fā)現(xiàn),均表達CD105、CD90和CD73,卻不表達HLA-DR、CD19、CD11b、CD45以及CD34。3誘導至第360分鐘后,實驗組各組細胞均有神經(jīng)樣細胞出現(xiàn),表現(xiàn)為細胞胞體收縮成橢圓形,伸出較長突起,以雙極細胞居多。免疫細胞化學檢測顯示實驗組各組NF-H、MAP-2表達陽性,膠質纖維酸性蛋白GFAP表達為陰性,C組(150μg/m L)細胞NF-H、MAP-2陽性表達率最高。對照組細胞誘導前后變化不明顯。結論 GM1可以誘人臍帶間充質干細胞向神經(jīng)樣細胞分化,150μg/m L為最合適誘導劑量。
【作者單位】： 河北省任丘市華北石油管理總醫(yī)院;
【關鍵詞】： 單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂 人臍帶間充質干細胞 誘導分化 神經(jīng)樣細胞
【分類號】：R329.2
【正文快照】： extending out longer processes,and the bipolar cells w ere the majority.The expression of NF-H and M AP-2w ere detected in the experimental group,w hereas GFAP w as negative.NF-H and M AP-2 in C group(150μg/m L)was at highest rate.Conclusion monosialo f

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本文編號：501686