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布魯氏菌Omp19基因真核載體的構建及對細胞免疫的影響

發(fā)布時間:2017-06-21 19:15

  本文關鍵詞:布魯氏菌Omp19基因真核載體的構建及對細胞免疫的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的了解羊種布魯氏菌Omp19基因在真核細胞中的表達和對細胞免疫的影響。方法根據(jù)GenBank公布的羊布魯氏菌16M株外膜蛋白Omp19基因序列設計1對引物,以其全基因組為模板進行擴增,Omp19基因擴增片段連接pMD18-T載體,轉(zhuǎn)染及測序鑒定正確后進行雙酶切,構建重組質(zhì)粒pLEX-MSC-Omp19,轉(zhuǎn)染巨噬細胞RAW264.7中,用Western blot分析Omp19基因在巨噬細胞內(nèi)的表達,酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測轉(zhuǎn)染Omp19基因的細胞干擾素-γ(IFN-γ)和IL-6分泌的影響。結果獲得534bp目的基因片段并成功構建Omp19真核表達載體,Omp19基因在巨噬細胞內(nèi)成功表達,表達蛋白Omp19可顯著提高細胞分泌IFN-γ和IL-6水平(P0.01)。結論 Omp19基因表達產(chǎn)物在細胞內(nèi)具有免疫原性,能提高細胞免疫水平,可作為亞單位疫苗候選基因。
【作者單位】: 銅仁學院護理學院;銅仁學院生物與農(nóng)林工程學院;石河子大學醫(yī)學院;銅仁市動物疫病防控中心;石河子大學動物科技學院;
【關鍵詞】布魯氏菌 omp基因 真核載體 細胞免疫
【基金】:國家自然科學基金項目(No.31502067) 杰出青年科技人才培育計劃項目(No.2013ZRKXJQ06) 教育廳自然科學基金重點項目(黔教合KY字[2015]411號) 貴州省科技合作計劃項目(黔科合LH字[2015]7238號;黔科合LH字[2015]7236號;黔科合LH字[2015]7237號) “野生動植物保護與利用”-省級重點學科項目(黔學位辦[2013]18號) 博士科研啟動基金項目(No.trxyDH1504)
【分類號】:R378
【正文快照】: ***布魯氏菌病是由布魯氏菌引起的人獸共患傳染病[1-2]。布魯氏菌為革蘭陰性兼性胞內(nèi)寄生菌,人體感染布魯氏菌急性期主要表現(xiàn)為惡寒、發(fā)熱、關節(jié)和肌肉痛等,可造成骨關節(jié)、神經(jīng)系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)等損害,慢性期主要為骨關節(jié)病及包括神經(jīng)系統(tǒng)在內(nèi)的多系統(tǒng)多器官損害,患者

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 杜志強;林濤;王建英;;布魯氏菌外膜蛋白基因omp19序列克隆與原核表達[J];生物技術;2013年06期


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本文編號:469694

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