發(fā)布時間：2017-06-09 09:20

  本文關鍵詞：采用活體成像技術快速評價DNA疫苗載體在小鼠體內(nèi)的表達，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的采用活體成像技術快速評價DNA疫苗載體在小鼠體內(nèi)的表達,為DNA疫苗載體的應用和改造提供參考。方法分別構建含有螢火蟲熒光素酶基因(luciferase)及HIV-1CN54Gag基因DNA,且攜帶不同轉錄調(diào)控元件(posttranscriptional regulatory element)HPRE/WPRE的疫苗載體(p DRVI1.0Luc、p DRVI1.0HLuc、p DRVI1.0WLuc、p DRVI1.0Gag、p DRVI1.0HGag和p DRVI1.0WGag),均經(jīng)后肢脛骨前肌注射BALB/c小鼠,20μg/只。p DRVI-1.0Luc、p DRVI1.0HLuc和p DRVI1.0WLuc組僅免疫1次,于免疫后第1、7、14天采用活體成像技術檢測小鼠體內(nèi)熒光表達強度;p DRVI1.0Gag、p DRVI1.0HGag和p DRVI1.0WGag組分別于第0、2、4周進行免疫,于末次免疫后第2周進行體液(ELISA法)及細胞免疫檢測(ELISPOT法)。結果 p DRVI1.0Luc、p DRVI1.0HLuc、p DRVI1.0WLuc組小鼠于免疫后第1及7天,體內(nèi)熒光均局限分布于注射部位,未出現(xiàn)擴散轉移的現(xiàn)象,且p DRVI1.0HLuc質(zhì)粒發(fā)光強度最強(P0.05),免疫第14天各組均未檢測到明顯的熒光素酶表達;p DRVI1.0HGag組小鼠血清中抗Gag蛋白特異性抗體水平和Gag蛋白特異的分泌IFNγ的脾淋巴細胞數(shù)均明顯高于p DRVI1.0Gag和p DRVI1.0WGag組(P0.05)。結論活體成像技術可用于快速評價DNA疫苗載體在小鼠體內(nèi)的表達,為DNA疫苗載體改造及免疫策略的優(yōu)化提供了一個良好的研究平臺。
【作者單位】： 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院醫(yī)學生物學研究所云南省蟲媒傳染病防控研究重點實驗室;中國疾病預防控制中心性病艾滋病預防控制中心;中國科學研究院合肥物質(zhì)科學研究院醫(yī)學物理與技術中心;
【關鍵詞】： 活體成像 DNA疫苗
【基金】：中國醫(yī)學科學院醫(yī)學生物學研究所科技計劃項目(IMB2013ZD01)
【分類號】：R392
【正文快照】： DNA疫苗是一種新型疫苗,被稱為第三代疫苗。與傳統(tǒng)的減毒活疫苗、滅活疫苗及蛋白亞單位疫苗比較,DNA疫苗具有安全性好、技術通用性好、可反復多次免疫、免疫反應更集中等優(yōu)勢[1]。DNA疫苗的免疫效果是由載體骨架及元件、靶抗原及佐劑、免疫方式、免疫方案等因素及其相互作用決

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