發(fā)布時(shí)間：2017-06-07 15:02

  本文關(guān)鍵詞：鼠源吲哚胺2,3-雙加氧酶活性檢測(cè)方法的建立，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的建立鼠源吲哚胺2,3-雙加氧酶(mouse indoleamine 2,3-dioxygenase,mIDO)活性檢測(cè)方法。方法利用基因工程方法表達(dá)純化重組mIDO(recombinant mIDO,rmIDO),建立酶水平mIDO活性檢測(cè)體系;構(gòu)建過表達(dá)mIDO的小鼠Lewis肺癌(Lewis lung cancer,LLC)細(xì)胞株,建立細(xì)胞水平mIDO活性檢測(cè)體系。比較L-1-甲基色氨酸(L-1-methyl tryptophan,L-1-MT)在酶及細(xì)胞水平上對(duì)mIDO及人源IDO(human IDO,hIDO)的抑制作用,測(cè)定抑制類型、抑制常數(shù)Ki值及半數(shù)抑制濃度(IC50)值。結(jié)果 L-1-MT對(duì)mIDO和hIDO均有抑制作用,抑制類型及抑制常數(shù)Ki值相似,但I(xiàn)C50值在酶水平及細(xì)胞水平上均有差異。結(jié)論 mIDO酶活性檢測(cè)體系是篩選IDO抑制劑的有效工具,與hIDO酶活性檢測(cè)體系聯(lián)用,能反映種屬差異,可更好地利用小鼠模型來替代人類進(jìn)行IDO抑制劑治療疾病的研究。
【作者單位】： 復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生物化學(xué)系;云南天然產(chǎn)物與生物制藥協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關(guān)鍵詞】： 吲哚胺 -雙加氧酶 鼠源 人源 活性檢測(cè)體系 L--甲基色氨酸
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81373396) 高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金(20130071110037) 上海市科委生物醫(yī)藥重點(diǎn)課題(12431900204)~~
【分類號(hào)】：R392-33
【正文快照】： 吲哚胺2,3-雙加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)是哺乳動(dòng)物中催化色氨酸沿著犬尿氨酸途徑(kynurenine pathway)代謝的第一個(gè)限速酶[1],也是細(xì)胞內(nèi)一種含亞鐵血紅素的單體胞質(zhì)蛋白酶,最早被發(fā)現(xiàn)于1967年[2],廣泛分布于人和動(dòng)物的細(xì)胞和組織中[3]。人源IDO(human IDO,hID

【相似文獻(xiàn)】

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王英明;不同亞型重組人白細(xì)胞介素8蛋白表達(dá)、純化與活性檢測(cè)[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

  本文關(guān)鍵詞：鼠源吲哚胺2,3-雙加氧酶活性檢測(cè)方法的建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：429384