本文關鍵詞：姜黃素修飾的絲素蛋白生物材料對細胞衰老的調(diào)控，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：隨著生活水平的提高和人口老齡化加劇,抗衰老越來越受到人們關注。生物體內(nèi)氧化損傷是機體衰老的重要原因。姜黃素是一種理想的自由基清除劑,并且具有抗菌、消炎等多重功效,但因其易被氧化失活,在生物醫(yī)用方面應用受到了很大的限制。絲素蛋白是一種天然大分子蛋白,具有良好的生物相容性,機械性性能以及可加工性。大量研究表明,絲素蛋白可以作為生物活性分子載體,有效維持其生物活性并提高藥物作用。本文通過向絲素蛋白溶液中添加乙醇和PEG,制備了姜黃素/絲素蛋白膜和姜黃素/絲素蛋白納米顆粒。通過SEM,FT-IR,DSC等分析了其形貌和結構等,發(fā)現(xiàn)經(jīng)誘導后的絲素蛋白主要為β折疊結構。研究姜黃素從膜中和納米顆粒中的釋放情況,發(fā)現(xiàn)絲素蛋白可以很好地調(diào)控姜黃素釋放,達到緩釋效果。DPPH自由基清除結果表明絲素蛋白可以更好的保持姜黃素的生物活性。進一步研究了姜黃素與絲素蛋白對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)衰老的調(diào)控,將姜黃素以三種不同方式與細胞作用后,檢測了所培養(yǎng)細胞的增殖和活力,P53、P16、HSP70基因表達以及β-半乳糖苷酶水平等衰老指標,發(fā)現(xiàn)游離姜黃素、姜黃素納米顆粒、姜黃素與絲素蛋白膜結合后均可以不同程度的延緩細胞衰老,且抗衰老效果與姜黃素添加劑量和培養(yǎng)時間有一定關系,姜黃素與絲素蛋白結合后的抗衰老效果優(yōu)于游離姜黃素。綜上所述,絲素蛋白作為一種優(yōu)異的活性分子載體,可以很好地穩(wěn)定姜黃素,提高姜黃素的利用價值,開發(fā)有效延緩細胞衰老的新技術。姜黃素與絲素蛋白結合的模式可以更廣泛的應用于組織工程方面。
【關鍵詞】：姜黃素 絲素蛋白 BMSCs 抗衰老
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R318.08;R339.38
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-11
• 第一章 引言11-22
• 1.1 衰老與抗衰老11-16
• 1.1.1 衰老機制11
• 1.1.2 抗衰老的意義11-12
• 1.1.3 干細胞在抗衰老研究中的重要意義12-13
• 1.1.4 衰老的指標13-16
• 1.2 天然抗氧化劑16-18
• 1.2.1 天然抗氧化劑概述16-17
• 1.2.2 天然抗氧化劑在抗衰老領域的應用17-18
• 1.3 天然蠶絲蛋白18-20
• 1.3.1 天然蠶絲蛋白的性能和結構18-19
• 1.3.2 天然蠶絲蛋白在組織工程上的應用19
• 1.3.3 天然蠶絲蛋白在穩(wěn)定生物活性分子上的應用19-20
• 1.4 本課題的研究目的和內(nèi)容20-22
• 第二章 游離姜黃素對細胞衰老的調(diào)控22-35
• 2.1 實驗材料與儀器22-23
• 2.1.1 實驗試劑和材料22-23
• 2.1.2 實驗儀器23
• 2.2 實驗方法23-27
• 2.2.1 再生蠶絲蛋白溶液的制備23-24
• 2.2.2 絲素蛋白膜的制備24
• 2.2.3 掃描電子顯微鏡（SEM）測試24
• 2.2.4 紅外光譜(FT-IR)測試24
• 2.2.5 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的提取和純化24-25
• 2.2.6 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)25
• 2.2.7 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的增殖檢測25
• 2.2.8 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的活力檢測25
• 2.2.9 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的基因表達檢測25-27
• 2.2.10 絲素蛋白膜對姜黃素的吸附檢測27
• 2.3 結果與討論27-34
• 2.3.1 絲素蛋白膜的形貌27-28
• 2.3.2 絲素蛋白膜的分子結構28-29
• 2.3.3 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSCs）的純化29-30
• 2.3.4 游離姜黃素對細增殖的影響30-31
• 2.3.5 游離姜黃素對細胞的活力的影響31
• 2.3.6 游離姜黃素對細胞衰老基因表達的影響31-33
• 2.3.7 在細胞培養(yǎng)環(huán)境中絲素蛋白對姜黃素的吸附33-34
• 2.4 本章小結34-35
• 第三章 姜黃素/絲素蛋白復合材料的制備和表征35-47
• 3.1 實驗材料與儀器35-36
• 3.1.1 實驗試劑和材料35-36
• 3.1.2 實驗儀器36
• 3.2 實驗方法36-38
• 3.2.1 再生蠶絲蛋白溶液的制備（同 2.2.1）36
• 3.2.2 姜黃素/絲素蛋白膜的制備36
• 3.2.3 姜黃素/絲素蛋白納米顆粒的制備36-37
• 3.2.4 掃描電子顯微鏡（SEM）測試（同 2.2.3）37
• 3.2.5 紅外光譜(FT-IR)測試（同 2.2.4）37
• 3.2.6 差式掃描熱量（DSC）分析37
• 3.2.7 激光共聚焦檢測37
• 3.2.8 粒徑分析37
• 3.2.9 姜黃素在絲素蛋白膜中的釋放檢測37-38
• 3.2.10 細胞培養(yǎng)環(huán)境下姜黃素絲素蛋白膜中的活性穩(wěn)定性檢測38
• 3.3 結果與討論38-45
• 3.3.1 姜黃素/絲素蛋白復合材料的形貌38-40
• 3.3.2 姜黃素/絲素蛋白復合膜的二級結構40-41
• 3.3.3 姜黃素/絲素蛋白納米顆粒的二級結構41-42
• 3.3.4 姜黃素在絲素蛋白膜中的分布42
• 3.3.5 姜黃素/絲素蛋白納米顆粒的粒徑分析42-43
• 3.3.6 抽提液環(huán)境下姜黃素從絲素蛋白膜中的釋放43-44
• 3.3.7 細胞培養(yǎng)環(huán)境下姜黃素從絲素蛋白膜中的釋放44
• 3.3.8 細胞培養(yǎng)環(huán)境下姜黃素在絲素蛋白膜中的活性穩(wěn)定性44-45
• 3.3.9 細胞培養(yǎng)環(huán)境下姜黃素在納米顆粒中的釋放45
• 3.4 本章小結45-47
• 第四章 姜黃素/絲素蛋白復合材料對細胞衰老的調(diào)控47-59
• 4.1 實驗材料與儀器47-48
• 4.1.1 實驗試劑47-48
• 4.1.2 實驗儀器48
• 4.2 實驗方法48-50
• 4.2.1 再生蠶絲蛋白溶液的制備（同 2.2.1）48
• 4.2.2 姜黃素/絲素蛋白膜的制備（同 3.2.2）48
• 4.2.3 姜黃素/絲素蛋白納米顆粒的制備（同 3.2.3）48
• 4.2.4 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的提取和純化（同 2.2.4）48
• 4.2.5.姜黃素絲素蛋白膜上培養(yǎng)細胞48
• 4.2.6 添加姜黃素納米顆粒培養(yǎng)細胞48-49
• 4.2.7 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞衰老的檢測49
• 4.2.8 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的 β-半乳糖苷酶表達49
• 4.2.9 絲素蛋白膜對姜黃素納米顆粒的吸附49-50
• 4.3 結果與討論50-58
• 4.3.1 姜黃素/絲素蛋白膜對細胞增殖的影響50-51
• 4.3.2 姜黃素/絲素蛋白膜對細胞活力的影響51
• 4.3.3 姜黃素/絲素蛋白膜對細胞衰老基因表達的影響51-53
• 4.3.4 姜黃素/絲素蛋白膜對細胞 β-半乳糖苷酶表達的影響53-54
• 4.3.5 姜黃素/納米顆粒對細胞增殖的影響54
• 4.3.6 姜黃素/絲素蛋白納米顆粒對細胞活力的影響54-55
• 4.3.7 姜黃素/絲素蛋白納米顆粒對細胞衰老基因表達的調(diào)控55-57
• 4.3.8 姜黃素/絲素蛋白納米顆粒對細胞 β-半乳糖苷酶表達的影響57-58
• 4.4 本章小結58-59
• 第五章 結論和展望59-61
• 5.1 結論59-60
• 5.2 展望60-61
• 參考文獻61-68
• 攻讀學位期間發(fā)表的論文68-69
• 致謝69-71

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1 楊新林,王俐勇,顧晉偉,朱鶴孫;等離子體處理的絲素蛋白作為人內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基質(zhì)的研究[J];中國生物醫(yī)學工程學報;2002年06期

2 趙珍;陳立艷;趙曉軍;;原子力顯微鏡下絲素纖維及絲素蛋白的形態(tài)結構研究[J];四川動物;2008年06期

3 鄧益斌;季丹;周平;;磁共振技術在絲素蛋白結構與功能研究中的應用[J];波譜學雜志;2008年04期

4 黃永利;呂強;李明忠;張冰;朱鶴孫;;電場調(diào)控載藥絲素蛋白微球的制備[J];科學通報;2011年13期

5 李玲玲;周偉;代方銀;梅梟雄;范承啟;楊霞;吳玉章;;不同鈣-醇溶解體系絲素蛋白的制備及表征研究[J];中國生物工程雜志;2012年04期

6 郭永偉;;多孔絲素蛋白材料及其在生物醫(yī)學領域研究新進展[J];科技信息;2013年04期

7 于同隱,蔡再生,黃偉達,施華芳,李宏杰;絲素蛋白亞基研究[J];高分子學報;1997年05期

8 劉明;閔思佳;朱良均;;冷凍干燥對絲素蛋白凝膠結構的影響[J];蠶業(yè)科學;2007年02期

9 馬林;何維仁;黃愛民;李立碩;童張法;韋俏娜;黃子倫;;絲素蛋白在甲醇-水混合溶劑中構象變化的光譜學研究[J];光譜學與光譜分析;2010年11期

10 章月虹;江騰;趙學舟;周平;;姜黃素抑制金屬離子誘導的絲素蛋白構象轉(zhuǎn)變及其作用機理[J];高等學校化學學報;2013年01期

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1 伊智峰;羅勇悅;陳鷹;彭政;丁麗;李永振;;天然橡膠/桑蠶絲絲素蛋白復合材料抗菌性能的研究[A];2009年全國高分子學術論文報告會論文摘要集（下冊）[C];2009年

2 袁青青;曹惠;邵正中;;電噴法制備絲素蛋白納米微球[A];2009年全國高分子學術論文報告會論文摘要集（上冊）[C];2009年

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4 王琳婷;朱良均;閔思佳;張海萍;;絲素蛋白在生物醫(yī)學領域的應用研究[A];中國蠶學會第六屆青年學術研討會論文集（3）[C];2009年

5 陳芳芳;閔思佳;朱良鈞;;交聯(lián)絲素蛋白凝膠的熱性能分析[A];中國蠶學會第四屆青年學術研討會會議論文集[C];2004年

6 范慰慰;顏若曦;趙東旭;;可溶性絲素蛋白的制備研究[A];第三屆全國化學工程與生物化工年會論文摘要集（下）[C];2006年

7 伊智峰;羅勇悅;陳鷹;彭政;丁麗;李永振;;天然橡膠/桑蠶絲絲素蛋白抗菌復合材料的制備與性能研究[A];2010年全國高分子材料科學與工程研討會學術論文集（上冊）[C];2010年

8 張海萍;朱良均;閔思佳;;絲素蛋白的結構、制備及其應用研究進展[A];全國桑樹種質(zhì)資源及育種和蠶桑綜合利用學術研討會論文集[C];2005年

9 劉小甜;楊明英;張海萍;朱良均;;絲素蛋白緩釋微球的研究進展[A];全國家(柞)蠶資源高值化利用學術研討會論文集[C];2013年

10 唐鳴;;絲素蛋白修復兔下頜骨臨界性骨缺損的初步實驗研究[A];浙江省醫(yī)學會耳鼻咽喉科學分會成立60周年慶典暨2011年浙江省醫(yī)學會耳鼻咽喉頭頸外科學學術年會論文匯編[C];2011年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 浙江理工大學先進紡織材料與制備教育部重點實驗室 陳建勇;銀離子改性絲素蛋白提高織物上染率[N];中國紡織報;2009年

2 本報記者 郭桂香;脆弱絲織品修復新添兩種加固方法[N];中國文物報;2009年

3 吳徵宇;編織皮膚經(jīng)緯[N];科技日報;2002年

4 本報記者 陶婷婷 通訊員 段然;高分子無處不在 讓生活更美好[N];上�？萍紙�;2013年

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1 賈明輝;絲素蛋白—納米銀對金黃色葡萄球菌及其生物膜相關性鼻竇炎的作用[D];復旦大學;2014年

2 尹建偉;再生絲素蛋白材料的制備[D];復旦大學;2011年

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6 耿磊;載納米銀海藻酸鈉、絲素蛋白新型泡沫聯(lián)合VSD一體化敷料的制備、性能及其對戰(zhàn)傷感染模型的療效[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2016年

7 曹正兵;絲素蛋白自組裝行為及其在生物醫(yī)藥方面的應用研究[D];復旦大學;2005年

8 魏偉;再生絲素蛋白水溶液的干法紡絲及后處理研究[D];東華大學;2011年

9 姚勇波;纖維素/絲素蛋白的共溶解與紡絲成形研究[D];東華大學;2015年

10 范純?nèi)?絲素蛋白/納米羥基磷灰石復合材料的仿生制備及促進脊柱融合的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學;2010年

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1 謝桂軍;絲素蛋白在離子液體中溶解及再生研究[D];東華大學;2009年

2 鐘一鳴;水溶液中再生絲素蛋白構象轉(zhuǎn)變的熒光研究[D];復旦大學;2008年

3 李靜靜;絲素蛋白/介孔生物玻璃復合材料的制備及止血抗菌性能的研究[D];浙江理工大學;2016年

4 陳麗燦;薯莨色素對莨紗綢蠶絲蛋白結構的影響[D];浙江理工大學;2016年

5 劉苗苗;基于現(xiàn)代免疫技術的紡織品文物微痕跡檢測研究[D];浙江理工大學;2016年

6 湯棟梁;基于絲素蛋白的反蛋白石結構三維細胞支架的構建研究[D];東南大學;2015年

7 劉晨;離心紡不同分子量再生絲素蛋白的可紡性研究[D];浙江理工大學;2016年

8 董文秀;絲蛋白質(zhì)結構變化與表面活性性能關系的研究[D];廣西科技大學;2015年

9 蔡玲;聚氨酯/絲素蛋白復合水凝膠的制備及刺激響應性研究[D];安徽大學;2016年

10 李正強;靜電紡絲左旋聚乳酸/絲素蛋白復合支架在軟骨組織工程中的應用[D];吉林大學;2016年

  本文關鍵詞：姜黃素修飾的絲素蛋白生物材料對細胞衰老的調(diào)控，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：428598