本文關(guān)鍵詞：低氧與低氧模擬劑對BMSCs成骨分化影響的對比研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的對比低氧培養(yǎng)與常氧條件下低氧模擬劑二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxalylglycine,DMOG)對小鼠BMSCs成骨分化的影響。方法原代分離培養(yǎng)健康3~4周齡昆明小鼠BMSCs,采用流式細(xì)胞術(shù)對細(xì)胞CD29、CD44、CD90、CD34表面標(biāo)志進(jìn)行檢測,行成骨、成脂、成軟骨誘導(dǎo)分化染色鑒定。取第3代BMSCs分為對照組(A組,常氧條件下培養(yǎng))、低氧培養(yǎng)組(B組,1%O2低氧條件下培養(yǎng))及DMOG干預(yù)組(C組,常氧條件下加入0.5 mmol/L DMOG培養(yǎng))。分別于培養(yǎng)1、2、3、4 d采用MTT法檢測BMSCs增殖情況,7、14 d檢測ALP含量,24 h后采用Western blot法檢測低氧誘導(dǎo)因子1α(hypoxia inducible factor,HIF-1α)蛋白表達(dá),3、7 d采用實(shí)時熒光定量PCR檢測RUNX2、Osterix基因表達(dá),21 d行茜素紅染色觀察。結(jié)果 BMSCs流式細(xì)胞術(shù)表面標(biāo)志鑒定示CD29(+)、CD44(+)、CD90(+)、CD34(-);成骨、成脂、成軟骨誘導(dǎo)分化后茜素紅染色、油紅O染色及甲苯胺藍(lán)染色均呈陽性。MTT法檢測示,培養(yǎng)1 d,3組細(xì)胞增殖比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);2、3、4 d,與A組比較,C組均抑制細(xì)胞增殖,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而B組則促進(jìn)細(xì)胞增殖,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。培養(yǎng)各時間點(diǎn),B、C組ALP含量、HIF-1α蛋白相對表達(dá)量及RUNX2、Osterix基因相對表達(dá)量均顯著高于A組,ALP含量及RUNX2、Osterix基因相對表達(dá)量C組高于B組,而HIF-1α蛋白相對表達(dá)量B組高于C組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。培養(yǎng)21 d茜素紅染色示,A組可見少許結(jié)節(jié)狀紅染物質(zhì),B組可見中等量紅染物質(zhì),而C組可見大量紅染物質(zhì)。結(jié)論低氧能明顯促進(jìn)BMSCs增殖,DMOG對BMSCs增殖無明顯影響;低氧與DMOG均能促進(jìn)BMSCs成骨分化,且DMOG促BMSCs成骨分化能力更強(qiáng)。
【作者單位】： 云南省第一人民醫(yī)院康復(fù)醫(yī)學(xué)科;昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院骨科;昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外二科;
【關(guān)鍵詞】： 低氧 低氧模擬劑 二甲基乙二酰基甘氨酸 成骨分化 小鼠
【基金】：云南省衛(wèi)計(jì)委科研基金資助項(xiàng)目(2011WS0033) 西南醫(yī)科大學(xué)校內(nèi)基金資助項(xiàng)目(15041)~~
【分類號】：R364.4
【正文快照】： 低氧誘導(dǎo)因子(hypoxia inducible factor,HIF)介導(dǎo)低氧適應(yīng)性反應(yīng),其可調(diào)控一系列轉(zhuǎn)錄因子和下游基因表達(dá),在細(xì)胞低氧反應(yīng)中發(fā)揮重要調(diào)控作用[1]。不少研究表明穩(wěn)定HIF蛋白能夠促進(jìn)干細(xì)胞成骨分化[2-4],但也有研究報(bào)道其能抑制干細(xì)胞成骨分化[5-7]。穩(wěn)定HIF蛋白,可通過降低細(xì)

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本文編號：426512