本文關(guān)鍵詞：焦磷酸測(cè)序法檢測(cè)OCT4啟動(dòng)子在大鼠骨髓源性肝干細(xì)胞分化中的甲基化變化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有分化成為肝細(xì)胞的潛能已得到證實(shí),但其分化的調(diào)控機(jī)理還不完全清楚。通過檢測(cè)大鼠骨髓源性肝干細(xì)胞(rat bone marrow-derived liver stem cells,RBMLSCs)誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞過程中OCT4啟動(dòng)子甲基化的變化,來探討啟動(dòng)子甲基化調(diào)控細(xì)胞分化的機(jī)制。RBMLSCs用25μg/L重組人肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子和0.1 nmol/L地塞米松進(jìn)行誘導(dǎo),在誘導(dǎo)之后不同時(shí)間點(diǎn)(0 d,7 d,14 d)提取細(xì)胞的DNA及RNA。用熒光定量PCR法檢測(cè)白蛋白(albumin,Alb)和OCT4的m RNA表達(dá)水平,應(yīng)用焦磷酸測(cè)序法定量檢測(cè)OCT4基因的啟動(dòng)子中4個(gè)Cp G位點(diǎn)的甲基化變化。結(jié)果表明:在RBMLSCs分化過程中,Alb m RNA持續(xù)增高(P0.05),但OCT4 m RNA表達(dá)在7 d及14 d明顯減少(P0.005);同時(shí)OCT4啟動(dòng)子上游的Cp G 1-2-3甲基化頻率顯著上升(P0.001),但Cp G 4甲基化無明顯變化。這些結(jié)果說明OCT4啟動(dòng)子高甲基化可能導(dǎo)致其m RNA表達(dá)減少,RBMLSCs多能性消失,但Cp G 4并不參與這一分化調(diào)控過程。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院肝膽外科;
【關(guān)鍵詞】： 大鼠骨髓源性肝干細(xì)胞 OCT 啟動(dòng)子甲基化 焦磷酸測(cè)序
【基金】：廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2010B080710169) 國家衛(wèi)計(jì)委重點(diǎn)臨床�？瀑Y助項(xiàng)目(W0211WAI44)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 干細(xì)胞在一定誘導(dǎo)條件下可分化為肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、軟骨細(xì)胞等多種成體細(xì)胞,具有多向分化潛能[1]。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一類來源廣泛的成體干細(xì)胞,分化為肝細(xì)胞的比例較高[2],有望成為終末期肝病的一種治療手段。然而隨著對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的深入研究,一些負(fù)面作用被發(fā)現(xiàn),特

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本文編號(hào)：402797