本文關鍵詞：人羊膜間充質干細胞對淋巴細胞增殖的影響及致瘤性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本試驗研究人羊膜間充質干細胞(hAMSCs)在體內、外條件下對淋巴細胞增殖的影響,并將hAMSCs接種到免疫缺陷小鼠皮下后,觀察hAMSCs致瘤情況,了解hAMSCs低免疫原性的可能機制,為干細胞臨床治療提供實驗依據。試驗通過雙酶消化法即兩次胰蛋白酶和一次Ⅰ型膠原酶共同消化分離hAMSCs,運用流式細胞術和免疫熒光的方法進行細胞學鑒定,確定獲得的細胞為hAMSCs，采用CCK-8的方法測定淋巴細胞活細胞數目,ELISA測定細胞上清液中干擾素-γ(IFN-γ)的表達,研究體外條件下hAMSCs對刀豆素蛋白(ConA)引起異體淋巴細胞增殖和淋巴細胞分泌IFN-γ劑量的影響；將CCl4橄欖油混合液按體重比腹腔注射到小鼠體內造小鼠肝損傷模型后,小鼠尾靜脈注射hAMSCs治療肝損傷,測定小鼠3d、7d、14d、21d、30d外周血中淋巴細胞量和血漿中IFN-γ水平變化；分別將5×106hAMSCs、5×106和1×107肝癌細胞(HepG2)皮下注射于免疫缺陷小鼠背部,觀察致瘤形成情況,50天后將腫瘤取出,HE染色進行組織學觀察。研究結果顯示,運用酶消化法分離培養(yǎng)hAMSCs,經鑒定、檢測后,獲得了純度較高的hAMSCs。CCK-8法測定,5μg/mLConA能夠引起淋巴細胞發(fā)生增殖,與hAMSCs共培養(yǎng)72h后,淋巴細胞活細胞數目較ConA刺激增殖組活細胞數目顯著降低(P0.01),hAMSCs抑制效果明顯。ELISA測定1×105個hAMSCs對淋巴細胞抑制72h的培養(yǎng)液中IFN-γ分泌情況,共培養(yǎng)組培養(yǎng)液中IFN-γ分泌量顯著低于對照組(P0.01)。尾靜脈注射hAMSCs肝損傷小鼠治療后,與損傷組相比,治療組小鼠淋巴細胞數量有降低趨勢；治療組小鼠體內血漿中IFN-γ含量隨著hAMSCs注入時間的延長也顯著降低(P0.01)。50d內hAMSCs組未見腫瘤形成,HepG2注射組均有瘤形成。測定注射hAMSCs組AFP、CEA指標,均為正常。
【關鍵詞】：人羊膜間充質干細胞 肝癌細胞 淋巴細胞增殖 干擾素-γ 致瘤性
【學位授予單位】：內蒙古農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-10
• 1 引言10-18
• 1.1 干細胞分類及意義10
• 1.2 間充質干細胞的研究進展10-17
• 1.2.1 MSC的來源及定義10-11
• 1.2.2 MSC免疫學特點11
• 1.2.3 MSC對可溶性因子的作用11-16
• 1.2.4 MSC優(yōu)勢治療應用16-17
• 1.3 試驗的背景及意義17-18
• 2 試驗研究18-41
• 2.1 人羊膜間充質干細胞對體內外淋巴細胞增殖的影響18-35
• 2.1.1 材料來源18-19
• 2.1.2 主要試劑與儀器19
• 2.1.3 方法19-24
• 2.1.4 試驗結果24-33
• 2.1.5 討論33-34
• 2.1.6 小結34-35
• 2.2 人羊膜間充質干細胞致瘤性研究35-41
• 2.2.1 材料與方法35-36
• 2.2.2 試驗結果36-40
• 2.2.3 討論40-41
• 2.2.4 小結41
• 3 結論41-42
• 致謝42-43
• 參考文獻43-49
• 作者簡介49

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前5條

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  本文關鍵詞：人羊膜間充質干細胞對淋巴細胞增殖的影響及致瘤性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：395635