Latexin是一個由222個氨基酸組成的分子量約為29kD的蛋白質。它是哺乳動物中唯一已知的羧肽酶抑制劑。目前,國內外對于Latexin的功能大部分集中在神經與發(fā)育以及腫瘤相關研究中,而對于炎癥方面的研究非常缺乏且機制相當不明確,因此我們以Latexin在腫瘤細胞炎癥反應中的作用為切入點進行研究。本論文主要包括以下內容:第一章,前言。第二章,通過Western Blot、免疫組織化學和細胞免疫熒光技術,分析了Latexin在體外培養(yǎng)細胞系和體內不同組織的分布與表達規(guī)律。第三章,通過蛋白質組學策略,進行Latexin蛋白質復合物的鑒定,并運用免疫沉淀及細胞免疫熒光技術,驗證相互作用蛋白。第四章,Latexin抗炎機制研究。通過雙螢光素酶報告基因系統(tǒng)和qRT-PCR,我們發(fā)現(xiàn)Latexin過表達抑制NF-?B-Luc活性以及抑制TNF-α誘導的炎癥因子表達(如ICAM1、VCAM1、IL-6等),表明Latexin可以抑制炎癥反應;通過細胞免疫熒光和EMSA實驗,發(fā)現(xiàn)Latexin抑制TNF-α誘導的p65核轉移及DNA binding活性;由于p65核轉移受I?Bα調控,通過在細胞中轉...

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.MouseLatexin三級結構（http://www.rcsb.org/3d-view/1WNH）

結構及其基因染色體定位由222個氨基酸組成的分子量約為29kD的蛋白質，是（它是一種幾乎不可逆的，非競爭性和有效的羧肽酶A1（CPA1）、羧肽酶A2（CPA2）和肥大細胞羧肽CPB）具有較少的抑制活性，并且對各種其他蛋白酶類CPA4結合并形成復合物[4]。有意思的....

圖2.Latexin基因在小鼠3號染色體上的圖譜,引自文獻[8]

圖2.Latexin基因在小鼠3號染色體上的圖譜,引自文獻[8]在神經系統(tǒng)中的作用最初發(fā)現(xiàn)于大鼠外側（而不是背側）大腦新皮質區(qū)域的顆粒層中表達Latexin的神經元位于新皮層的受限部位，因此，Latexin[9]。進一步的研究表明，Latexin在調節(jié)感覺知覺....

圖3.NF-B信號通路圖，引自文獻[41]

圖3.NF-B信號通路圖，引自文獻[41]在NF-B通路中的作用由76個氨基酸組成的小分子多肽，廣泛存在于細胞中。單獨的能，只是一種分子標記蛋白，其發(fā)揮作用必須在ATP條件下，。蛋白質泛素化是一種翻譯后修飾過程，將單個或多個泛素蛋素化是通過三個酶促步驟催化的....

圖4.泛素化介導的蛋白質降解過程，引自文獻[46]

圖4.泛素化介導的蛋白質降解過程，引自文獻[46]泛素連接酶E3在泛素化過程中具有重要作用。泛素連接酶E3根據特定的結分為兩類：（1）HECT結構域家族；（2）RING結構域家族。具有HECT結構泛素連接酶E3是唯一可以和泛素形成硫酯鍵中間體[53,54]....

本文編號：3890852