SAHA對(duì)TGF-β誘導(dǎo)人胚肺成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響
發(fā)布時(shí)間:2024-01-28 10:13
目的 探討在轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)刺激下,組蛋白去乙;敢种苿┬炼1桨樊惲u肟酸(SAHA)對(duì)人胚肺成纖維細(xì)胞系HELF向肌成纖維細(xì)胞(MF)分化的影響,從而為其用于治療IPF提供理論依據(jù)。 方法 實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組,TGF-β1組(5ng/mL)和不同濃度SAHA處理組(0.5,2,5μM)。體外培養(yǎng)HELF細(xì)胞,用5ng/mL TGF-β1和5μM SAHA共同刺激24h,觀察處理前后細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化情況,以探討SAHA對(duì)HELF向肌成纖維細(xì)胞(MF)轉(zhuǎn)分化過程的影響; HELF細(xì)胞先用TGF-β1刺激24h,隨后加入0.5,2,5μM SAHA共孵育24h,MTT法檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況,Western blot檢測(cè)α-SMA表達(dá),比色法測(cè)量羥脯氨酸的含量,天狼猩紅染色分析總膠原含量,以及RT-PCR檢測(cè)I、III型前膠原的mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果 1.正常對(duì)照組的細(xì)胞呈長(zhǎng)梭形,呈一定的弧形生長(zhǎng),胞核較大,成卵圓形且多居中。經(jīng)TGF-β1作用后,細(xì)胞密度明顯增加,呈漩渦狀、放射性生長(zhǎng)。當(dāng)HELF細(xì)胞經(jīng)5μM SAHA共同孵育后,細(xì)胞間隔增寬,突起縮短,細(xì)胞質(zhì)減少。 2.HEL...
【文章頁(yè)數(shù)】:42 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
本文編號(hào):3887573
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圖2.SAHA對(duì)HELF細(xì)胞增殖的影響(MTT)
圖3.SAHA對(duì)HELF細(xì)胞產(chǎn)生羥脯氨酸的影響
圖5.SAHA干預(yù)對(duì)HELF細(xì)胞總膠原產(chǎn)生的影響
圖6.SAHA對(duì)HELF細(xì)胞I型與III型前膠原產(chǎn)生的影響
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