內(nèi)脂素對(duì)急性肺損傷肺內(nèi)細(xì)胞凋亡和自噬以及PI3K/AKT信號(hào)通路的影響
發(fā)布時(shí)間:2023-09-16 09:52
內(nèi)臟脂肪素,簡(jiǎn)稱(chēng)內(nèi)脂素(Visfatin),是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一種參與機(jī)體炎癥和免疫應(yīng)答反應(yīng)的脂肪細(xì)胞因子,它的發(fā)現(xiàn)推動(dòng)了脂肪組織和炎癥之間關(guān)系的研究,而炎癥又可以引起細(xì)胞凋亡和自噬,所以?xún)?nèi)脂素可能直接或間接影響細(xì)胞凋亡和自噬反應(yīng)。急性肺損傷(ALI)是全身炎癥反應(yīng)綜合征表現(xiàn)在肺部的呼吸系統(tǒng)性疾病,經(jīng)常被用作一種炎癥模型。研究發(fā)現(xiàn),在急性肺損傷動(dòng)物模型中,肺泡灌洗液的內(nèi)脂素水平升高,推測(cè)內(nèi)脂素作為炎性介質(zhì)可能參與肺部炎癥的發(fā)生和發(fā)展,從而影響細(xì)胞凋亡和自噬。因此,本試驗(yàn)以昆明小鼠為研究對(duì)象,利用LPS構(gòu)建的急性肺損傷模型,通過(guò)HE染色、TUNEL、透射電鏡、免疫組織化學(xué)染色、實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot等技術(shù)方法研究?jī)?nèi)脂素對(duì)急性肺損傷肺部細(xì)胞凋亡、自噬及PI3K/AKT信號(hào)通路的作用,以探討內(nèi)脂素是否通過(guò)PI3K/AKT信號(hào)通路調(diào)節(jié)凋亡和自噬參與炎癥反應(yīng),闡明內(nèi)脂素在LPS介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)中與肺內(nèi)細(xì)胞凋亡和自噬之間的關(guān)系及作用機(jī)制。研究結(jié)果如下:1.內(nèi)脂素對(duì)急性肺損傷肺組織結(jié)構(gòu)的影響利用LPS誘導(dǎo)構(gòu)建的急性肺損傷模型,取肺組織制作石蠟切片并進(jìn)行HE染色。顯微鏡下觀察:生理鹽...
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)表
1 前言
1.1 立題背景
1.2 文獻(xiàn)綜述
1.2.1 內(nèi)脂素的研究進(jìn)展
1.2.2 急性肺損傷的研究進(jìn)展
1.2.3 內(nèi)脂素與急性肺損傷的關(guān)系
1.2.4 細(xì)胞凋亡與自噬之間的關(guān)系
1.2.5 PI3K/AKT信號(hào)通路的研究進(jìn)展
1.3 研究的目的和意義
2 材料與方法
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及處理
2.1.2 主要儀器與試劑
2.1.3 主要溶液和試劑的配制
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 樣品采集和處理
2.2.2 石蠟切片的制作
2.2.3 HE染色
2.2.4 透射電鏡
2.2.5 細(xì)胞凋亡檢測(cè)技術(shù)(TUNEL法)
2.2.6 免疫組化
2.2.7 熒光定量q-PCR
2.2.8 Western Blot
3 結(jié)果
3.1 不同試驗(yàn)組肺組織結(jié)構(gòu)的變化
3.1.1 肺組織病理學(xué)變化
3.1.2 小鼠肺組織內(nèi)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)
3.2 內(nèi)脂素對(duì)急性肺損傷肺組織細(xì)胞凋亡的影響
3.2.1 凋亡細(xì)胞的檢測(cè)
3.2.2 不同試驗(yàn)組凋亡因子的mRNA表達(dá)
3.2.3 不同試驗(yàn)組凋亡相關(guān)因子的蛋白表達(dá)
3.3 內(nèi)脂素對(duì)急性肺損傷肺組織細(xì)胞自噬的影響
3.3.1 透射電鏡檢測(cè)自噬小體
3.3.2 不同試驗(yàn)組自噬因子的定位表達(dá)
3.3.3 不同試驗(yàn)組自噬因子的mRNA表達(dá)
3.3.4 不同試驗(yàn)組自噬因子蛋白的表達(dá)
3.4 內(nèi)脂素對(duì)急性肺損傷PI3K/AKT信號(hào)通路相關(guān)基因的影響
4 討論
4.1 內(nèi)脂素對(duì)急性肺損傷肺組織結(jié)構(gòu)的影響
4.2 內(nèi)脂素對(duì)急性肺損傷肺組織細(xì)胞凋亡的影響
4.3 內(nèi)脂素對(duì)急性肺損傷肺組織細(xì)胞自噬的影響
4.4 急性肺損傷肺中內(nèi)脂素、細(xì)胞自噬和凋亡之間的關(guān)系
4.5 內(nèi)脂素對(duì)PI3K/AKT信號(hào)通路的影響
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄1 個(gè)人簡(jiǎn)介
附錄2 論文發(fā)表情況
本文編號(hào):3846796
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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摘要
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1 前言
1.1 立題背景
1.2 文獻(xiàn)綜述
1.2.1 內(nèi)脂素的研究進(jìn)展
1.2.2 急性肺損傷的研究進(jìn)展
1.2.3 內(nèi)脂素與急性肺損傷的關(guān)系
1.2.4 細(xì)胞凋亡與自噬之間的關(guān)系
1.2.5 PI3K/AKT信號(hào)通路的研究進(jìn)展
1.3 研究的目的和意義
2 材料與方法
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及處理
2.1.2 主要儀器與試劑
2.1.3 主要溶液和試劑的配制
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 樣品采集和處理
2.2.2 石蠟切片的制作
2.2.3 HE染色
2.2.4 透射電鏡
2.2.5 細(xì)胞凋亡檢測(cè)技術(shù)(TUNEL法)
2.2.6 免疫組化
2.2.7 熒光定量q-PCR
2.2.8 Western Blot
3 結(jié)果
3.1 不同試驗(yàn)組肺組織結(jié)構(gòu)的變化
3.1.1 肺組織病理學(xué)變化
3.1.2 小鼠肺組織內(nèi)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)
3.2 內(nèi)脂素對(duì)急性肺損傷肺組織細(xì)胞凋亡的影響
3.2.1 凋亡細(xì)胞的檢測(cè)
3.2.2 不同試驗(yàn)組凋亡因子的mRNA表達(dá)
3.2.3 不同試驗(yàn)組凋亡相關(guān)因子的蛋白表達(dá)
3.3 內(nèi)脂素對(duì)急性肺損傷肺組織細(xì)胞自噬的影響
3.3.1 透射電鏡檢測(cè)自噬小體
3.3.2 不同試驗(yàn)組自噬因子的定位表達(dá)
3.3.3 不同試驗(yàn)組自噬因子的mRNA表達(dá)
3.3.4 不同試驗(yàn)組自噬因子蛋白的表達(dá)
3.4 內(nèi)脂素對(duì)急性肺損傷PI3K/AKT信號(hào)通路相關(guān)基因的影響
4 討論
4.1 內(nèi)脂素對(duì)急性肺損傷肺組織結(jié)構(gòu)的影響
4.2 內(nèi)脂素對(duì)急性肺損傷肺組織細(xì)胞凋亡的影響
4.3 內(nèi)脂素對(duì)急性肺損傷肺組織細(xì)胞自噬的影響
4.4 急性肺損傷肺中內(nèi)脂素、細(xì)胞自噬和凋亡之間的關(guān)系
4.5 內(nèi)脂素對(duì)PI3K/AKT信號(hào)通路的影響
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
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附錄2 論文發(fā)表情況
本文編號(hào):3846796
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