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光輝霉素A調(diào)節(jié)腎上腺髓質(zhì)素表達(dá)改善帕金森病模型小鼠行為學(xué)異常

發(fā)布時(shí)間:2022-10-09 15:36
  目的探討光輝霉素A(mithramycin A,MMA)通過調(diào)節(jié)腎上腺髓質(zhì)素(adrenomedullin,ADM)表達(dá)改善帕金森。≒arkinson’s disease,PD)模型小鼠行為學(xué)異常的機(jī)制。方法 12. 5周齡雄性C57BL/6小鼠40只隨機(jī)分為對(duì)照組,1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)毒性組,MMA與MPTP聯(lián)合注射組和MMA單獨(dú)注射組。采用腹腔注射MPTP的方法建立PD小鼠模型。造模成功后進(jìn)行小鼠自主活動(dòng)和避暗實(shí)驗(yàn)行為學(xué)檢測(cè),記錄小鼠穿格次數(shù)、站立次數(shù)及避暗實(shí)驗(yàn)潛伏期。同時(shí)使用TH免疫熒光染色檢測(cè)小鼠中腦紋狀體多巴胺能神經(jīng)纖維密度,采用ELISA方法檢測(cè)小鼠紋狀體中ADM表達(dá)水平。并進(jìn)一步在1-甲基-4-苯基-吡啶離子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞PD模型中通過染色質(zhì)免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,Ch IP)實(shí)驗(yàn)觀察SP1與ADM啟動(dòng)子DNA結(jié)合及轉(zhuǎn)錄活... 

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 主要試劑
    1.2 SH-SY5Y細(xì)胞培養(yǎng)及分組處理
    1.3 MPTP小鼠PD模型建立
    1.4 小鼠自主活動(dòng)和避暗實(shí)驗(yàn)
    1.5 染色質(zhì)免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)
    1.6 免疫熒光染色
    1.7 紋狀體內(nèi)ADM含量檢測(cè)
    1.8 統(tǒng)計(jì)分析
2 結(jié)果
    2.1 MMA對(duì)MPTP毒性誘導(dǎo)的C57BL/6小鼠中腦紋狀體多巴胺能神經(jīng)纖維密度降低的影響
    2.2 MMA對(duì)MPTP毒性誘導(dǎo)的C57BL/6小鼠行為學(xué)異常的影響
    2.3 MMA對(duì)C57BL/6小鼠紋狀體中MPTP毒性誘導(dǎo)的ADM水平升高的影響
    2.4 MMA對(duì)細(xì)胞核中MPP+誘導(dǎo)的SP1與ADM啟動(dòng)子的DNA結(jié)合及轉(zhuǎn)錄活性增強(qiáng)的影響
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本文編號(hào):3688901

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