目的探討體外分離兔軟骨細(xì)胞的方法并觀察其與Ⅰ/Ⅱ型復(fù)合膠原膜共培養(yǎng)時(shí)的生物活性。方法取4周齡的新西蘭大耳兔,處死后在無(wú)菌條件下取關(guān)節(jié)軟骨。通過(guò)胰蛋白酶和Ⅱ型膠原酶消化軟骨細(xì)胞。倒置相差顯微鏡下觀察軟骨細(xì)胞特點(diǎn),制作細(xì)胞爬片行甲苯胺藍(lán)染色。將第3代兔軟骨細(xì)胞與Ⅰ/Ⅱ型復(fù)合膠原膜共培養(yǎng),噻唑藍(lán)（MTT）法和糖胺聚糖含量測(cè)定法檢測(cè)軟骨細(xì)胞在膠原膜上的細(xì)胞活性,掃描電鏡觀察軟骨細(xì)胞在復(fù)合膠原膜上的生長(zhǎng)情況。結(jié)果分離出的原代軟骨細(xì)胞初為卵圓形,貼壁后變成三角形或多邊形,可被甲苯胺藍(lán)染色。軟骨細(xì)胞在Ⅰ/Ⅱ型復(fù)合膠原膜上生長(zhǎng)良好。結(jié)論兩部酶法可獲得大量軟骨細(xì)胞,MTT法和掃描電鏡證實(shí)軟骨細(xì)胞可在復(fù)合膠原膜上正常擴(kuò)增。 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、傳代
        1.2.2軟骨細(xì)胞爬片甲苯胺藍(lán)染色
        1.2.3Ⅰ/Ⅱ型復(fù)合膠原膜與軟骨細(xì)胞共培養(yǎng)之前的消毒、浸泡
        1.2.4 MTT法檢測(cè)軟骨細(xì)胞在Ⅰ/Ⅱ型復(fù)合膠原膜上的細(xì)胞活性
        1.2.5糖胺聚糖水平檢測(cè)
        1.2.6掃描電鏡觀察軟骨細(xì)胞與Ⅰ/Ⅱ型復(fù)合膠原膜復(fù)合物
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 軟骨細(xì)胞形態(tài)及存活率
    2.2 軟骨細(xì)胞爬片甲苯胺藍(lán)染色
    2.3MTT法檢測(cè)軟骨細(xì)胞在Ⅰ/Ⅱ型復(fù)合膠原膜上的細(xì)胞活性
    2.4 糖胺聚糖水平檢測(cè)
    2.5 掃描電鏡觀察軟骨細(xì)胞與Ⅰ/Ⅱ型復(fù)合膠原膜復(fù)合物
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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