目的:上世紀80年代,隨著DNA重組技術(shù)的成熟,將其廣泛應(yīng)用于分子生物學和抗體基因結(jié)構(gòu)的改造�？贵w制備技術(shù)已從多克隆抗體、單克隆抗體發(fā)展到基因工程抗體。隨著噬菌體展示技術(shù)、酵母展示技術(shù)等的出現(xiàn)大大提高了抗體的制備�；蚬こ炭贵w又經(jīng)歷了Fab抗體、sc Fv抗體、全人源抗體等,其具有穿透性強,分子量小,便于操作,不與Fc受體結(jié)合等特點,成為基因工程抗體研究熱點。近年來,隨著深入的研究,體外篩選技術(shù)成為篩選全人源抗體的主要方式。支氣管哮喘是一種與遺傳和環(huán)境密切相關(guān)的疾病,在過去幾十年里,支氣管哮喘發(fā)作在發(fā)達國家中逐年上升的趨勢。相比之下,遺傳因素一定在這樣一個相對較短的時間不變。雖然數(shù)百研究員列出了幾個潛在的遺傳因素可能影響疾病易感性,但沒有成功的嘗試針對任何特定的基因因素來治療支氣管哮喘。根據(jù)哮喘的發(fā)病機制從基礎(chǔ)分子免疫學、分子病理生理學的新發(fā)現(xiàn)去針對性的研制依從性較好、副作用少,可以改善患者病癥的藥物。無論是在小鼠和人上,細胞因子在哮喘的病理生理學非常重要,提出了一種抑制Th2等細胞因子如白介素（IL）-4,IL-5,和IL-13可能是一個合理的治療哮喘方法。其中IL-13主要由CD4... 

【文章來源】：西南醫(yī)科大學四川省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

SDS-PAGE鑒定IL-13蛋白

圖 2：Dot Blot 和 Western Blot 鑒定表達的 IL-13 蛋白Figure 2: Identification of purified IL-13 by Dot Blot and Western BlotNote: M. BenchMarkTMpre-stained protein ladder （ Invitrogen ） Identification of purified IL-13 by Dot Blot.B. Identification of purified ILby Western Blot2 抗 IL-13 全人源單鏈抗體的篩選及鑒定2.1 抗 IL-13 全人源單鏈抗體的篩選以人 IL-13 生物素的蛋白為抗原，采用液相富集即噬菌體展示技術(shù)實抗 IL-13 單鏈抗體的富集。進行 3 輪富集后，隨機挑取單克隆子進行小量

ELISA檢測經(jīng)三輪富集后文庫單鏈抗體與人IL-13的結(jié)合作用Figure3:TestthebindingofIL-13andscFvsfromantibodylibraryenriched

【參考文獻】：
期刊論文
[1]IL-4、IL-13蛋白表達及抗IL-4、IL-13人源單鏈抗體的篩選[J]. 袁青,黃黎,郭夕源,葉迎春,年四季.  中國免疫學雜志. 2013(06)

碩士論文
[1]抗胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素（TSLP）全人源單鏈抗體的篩選及特性分析[D]. 朱建光.四川醫(yī)科大學 2015



本文編號：3621999