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G蛋白抑制性α亞基Gαil/3在腦源性神經營養(yǎng)因子信號轉導通路中的重要作用

發(fā)布時間:2022-01-20 15:10
  研究目的:G蛋白參與的信號轉導是生物體內非常保守且重要的信號轉導機制。目前多數研究認為G蛋白以G蛋白偶聯受體(GPCRs)的形式參與信號轉導。我們課題組先前的研究已經發(fā)現,G蛋白抑制性α亞基1/3(Gαi1/3)以一種新的方式參與信號轉導,即Gαi1/3參與到表皮生長因子(EGF)及其受體EGFR和角質細胞生長因子(KGF)及其受體KGFR激活下游AKT-mTORC1信號,并在信號轉導過程中起到關鍵作用。生長因子信號激活后,Gαi1/3與生長因子受體結合蛋白2(Grb2)相關結合蛋白1(Gab1)以及生長因子受體形成復合物,且在生長因子受體對Gab1的磷酸化過程中起到關鍵作用。BDNF是神經系統中十分重要的營養(yǎng)因子,我們試圖探究Gαi1/3是否在BDNF及其受體TrkB激活的下游信號通路中起到重要作用,并初步探索Gαi1/3對小鼠行為表型的影響。研究方法:野生型(WT)和Gαi1/3雙敲除型(DKO)小鼠的胚胎成纖維細胞(MEFs),Gαi1單敲除的MEF細胞,Gαi3單敲除的MEF細胞,野生型(WT)分別轉入干擾Gαi1和Gαi3表達的siRNA的MEF細胞,Gab1敲除的MEF細胞... 

【文章來源】:蘇州大學江蘇省 211工程院校

【文章頁數】:73 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
材料與方法
    1 實驗材料
        1.1 實驗用細胞及實驗動物
        1.2 實驗器材及儀器
        1.3 實驗藥品、試劑、抗體
        1.4 實驗試劑制備
    2 實驗方法
        2.1 小鼠原代胚胎神經元提取和培養(yǎng)
        2.2 MEF細胞傳代及細胞處理前鋪板
        2.3 脂質體轉染(6 孔板)
        2.4 慢病毒穩(wěn)轉細胞株篩選
        2.5 Western Blot
        2.6 曠場實驗(Open Field Test,OFT)
        2.7 懸尾實驗(Tail Suspension Test,TST)
        2.8 強迫游泳(Forced Swimming Test, FST)
        2.9 高架十字迷宮試驗(the Elevated Plus Maze, EPM)
        2.10 新環(huán)境進食抑制實驗(Novelty Suppressed Feeding Test, NSF)
        2.11 成年小鼠心臟灌流
        2.12 振動切片制備
        2.13 熒光免疫組織化學染色
        2.14 統計學方法
結果與分析
討論
結論
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
攻讀學位期間本人公開發(fā)表的論文
中英文縮略詞表
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]Tropomyosin-related kinase B/brain derived-neurotrophic factor signaling pathway as a potential therapeutic target for colorectal cancer[J]. Hussein Akil,Aurélie Perraud,Marie-Odile Jauberteau,Muriel Mathonnet.  World Journal of Gastroenterology. 2016(02)



本文編號:3599045

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