第一部分H7亞型禽流感DNA疫苗的免疫原優(yōu)化研究目的：通過優(yōu)化DNA疫苗的免疫原設(shè)計提高H7禽流感疫苗的免疫原性。方法：以2003年H7亞型禽流感病毒荷蘭株A/Netherlands/219/2003（H7N7）血凝素（HA）為免疫原,設(shè)計三種表達(dá)血凝素的DNA疫苗。第一種以自身引導(dǎo)序列表達(dá)全長HA；第二種以人纖溶酶原激活物（tPA）替換自身的引導(dǎo)序列表達(dá)全長HA；第三種去除HA的跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),以tPA為引導(dǎo)序列表達(dá)截短的HA。以新西蘭兔為動物模型進(jìn)行免疫。ELISA檢測免疫兔血清中HA特異性結(jié)合抗體的水平,血凝抑制實驗和假病毒中和實驗檢測免疫兔血清中針對同源性和異源性H7禽流感病毒的保護(hù)性抗體水平,收集3例2013年H7N9禽流感患者血清,分析其對本實驗疫苗株H7禽流感病毒的交叉中和能力。結(jié)果：三種表達(dá)血凝素的DNA疫苗均誘導(dǎo)實驗兔產(chǎn)生高水平的結(jié)合抗體,無論是針對同源性還是異源性的H7禽流感病毒,均以tPA為引導(dǎo)序列表達(dá)全長HA的DNA疫苗誘導(dǎo)的功能性抗體的水平最高,以自身引導(dǎo)序列表達(dá)全長HA的DNA疫苗次之,表達(dá)截短HA的DNA疫苗誘導(dǎo)功能性抗體的能力最差。2013年H7N9禽流... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：174 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

7HANL219DNA疫苗的構(gòu)建

DNA疫苗酶切鑒定圖

19.dTM (未 11切}4. H7 HA HL219.wt (BamH l+Pst 1)5. H7 HA HL219.wt (BamH l+Nhe I)6. H7 HA HL219.wt (BamH 丨+Hhe I)圖2.DNA疫苗酶切鑒定圖3. ELISA法檢測免疫兔血清HA特異性抗體應(yīng)用ELISA檢測動物免疫血清中HA特異性抗體，結(jié)果表明在DNA疫苗2次免疫后2周（第4周）可以檢測到HA特異性抗體，第3次免疫后2周（第6周）抗體水平進(jìn)一步升高（圖3A)。檢測第4次免疫后兩周HA特異性抗體的滴度，三種DNA疫苗免疫組均產(chǎn)生高水平的HA抗體（104-105)(圖3B)。空載體免疫組血清未檢測到HA特異性抗體。45

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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