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KLF2調控Nrf2/Bach1在CSE誘導的大鼠氣道上皮細胞氧化與抗氧化機制中的作用

發(fā)布時間:2021-11-08 04:49
  【目的】研究Klf2及Nrf2/Bach1在經(jīng)CSE刺激的大鼠氣道上皮細胞中的表達,明確其感受氧化應激對靶基因γ-GCS的調控作用;探討CSE對氣道上皮細胞凋亡的影響,及其與氧化抗氧化反應之間的關系;觀察KLF2質粒轉染細胞后分別對Nrf2、Bach1和γ-GCS表達水平的影響!痉椒ā繉嶒灧譃閮刹糠。(1)不轉染質粒的細胞部分:采用酶消化法提取大鼠原代氣管-支氣管上皮細胞,噻唑藍(MTT)比色法測定10%香煙煙霧提取物(cigarette smoke extract,CSE)在不同時間點作用于細胞后對細胞增殖的影響;選取6小時時間點用Hoechst染色觀察細胞形態(tài)變化;并檢測該時間點細胞活性氧ROS含量;用雙酶法檢測γ-GCS活性;通過免疫細胞化學法觀察Nrf2/Bach1的核轉位;Western blot、RT-PCR技術研究細胞中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS的蛋白及mRNA表達。(2)轉染質粒的細胞部分:給予Klf2質粒轉染細胞使之基因過表達,用Western blot、RT-PCR法觀察細胞中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS的蛋白及mRNA表達變化。【結... 

【文章來源】:南華大學湖南省

【文章頁數(shù)】:57 頁

【學位級別】:碩士

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ABSTRACT
前言
材料與方法
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本文編號:3483035

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