目的:煙曲霉（Aspergillus fumigatus,A.fumigatus）是一種常見(jiàn)的通過(guò)空氣傳播的條件性致病絲狀真菌,常存在于高溫堆肥和腐爛植物中,對(duì)其生存環(huán)境的擾動(dòng)會(huì)釋放大量的分生孢子（conidia）,導(dǎo)致免疫能力低下的人易患侵襲性曲霉�。↖nvasive aspergillosis,IA）,甚至危及生命。自噬作為另一種程序性細(xì)胞死亡,與凋亡有顯著的區(qū)別�！白允尚约�(xì)胞死亡”在形態(tài)學(xué)上存在突出特點(diǎn)是細(xì)胞質(zhì)產(chǎn)生大量自噬液泡（autophagic vacuolization of the cytoplasm）。自噬在酵母和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中廣泛研究,酵母是單細(xì)胞生物,哺乳動(dòng)物是復(fù)雜的高級(jí)多細(xì)胞生物,而絲狀真菌作為低級(jí)多細(xì)胞模式生物,其自噬研究尚少,但逐漸引起重視。對(duì)煙曲霉的自噬研究結(jié)果顯示:EDTA可以誘導(dǎo)煙曲霉的自噬,包括液泡的大量形成,產(chǎn)生自噬顆粒;atg1基因敲除使菌絲自噬顆粒消失,在營(yíng)養(yǎng)缺乏培養(yǎng)基失去菌絲延伸能力;在饑餓狀態(tài),ATG8蛋白在野生菌株液泡中累積,atg1基因敲除使ATG8蛋白不能在液泡中累積。在真核生物中,c AMP信號(hào)通路參與多種調(diào)節(jié)過(guò)程,且已有研究證明這一... 

【文章來(lái)源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
材料和方法
    1 實(shí)驗(yàn)菌株和動(dòng)物
    2 實(shí)驗(yàn)試劑
    3 實(shí)驗(yàn)設(shè)備及儀器
    4 實(shí)驗(yàn)方法
        4.1 存活率的檢測(cè)
        4.2 煙曲霉自噬體的形態(tài)學(xué)觀察
        4.3 MDC染色法對(duì)自噬體進(jìn)行染色
        4.4 Real-timePCR法檢測(cè)自噬相關(guān)基因的表達(dá)
        4.5 營(yíng)養(yǎng)缺乏時(shí),菌絲延伸能力的檢測(cè)
        4.6 Westernblot法檢測(cè)煙曲霉感染的小鼠LC3-Ⅱ蛋白表達(dá)水平
    5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
    1 pkaR敲除降低煙曲霉存活率
    2 形態(tài)學(xué)觀察pkaR敲除對(duì)煙曲霉自噬的影響
    3 MDC染色觀察pkaR敲除對(duì)煙曲霉自噬體的影響
    4 pkaR敲除提高煙曲霉Afatg1的mRNA水平
    5 pkaR敲除提高煙曲霉Afatg8的mRNA水平
    6 pkaR敲除提高煙曲霉Afatg11的mRNA水平
    7 pkaR敲除對(duì)煙曲霉菌絲延伸能力的影響
    8 煙曲霉感染小鼠LC3-Ⅱ蛋白表達(dá)水平檢測(cè)
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]青蒿琥酯治療肺煙曲霉感染自噬機(jī)制[J]. 戴京京,王丹丹,周武碧,劉敏.  中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志. 2018(02)



本文編號(hào)：3445170