腸道病毒71型（EV71）是引起嬰幼兒手足口病的一種重要病原病毒,其屬于小RNA病毒科,腸道病毒屬（Enterovirus）成員,是一種無囊膜的正鏈RNA病毒。EV71病毒基因組大小約為7400個核苷酸,編碼4個結構蛋白和7個非結構蛋白,在EV71病毒感染過程中,時常會誘導宿主細胞凋亡進而抑制病毒的復制。而另一方面,EV71病毒會激活宿主細胞的抗凋亡通路,比如PI3K/Akt信號通路,抑制細胞凋亡而幫助病毒完成生命周期。然而截至目前,在EV71病毒感染過程中,細胞凋亡和PI3K/Akt信號通路的相互作用關系尚不清楚。因而本研究綜合運用Western Blot、免疫熒光技術、流式細胞術、免疫共沉淀技術、基因沉默、藥物阻斷等實驗方法,系統(tǒng)研究EV71病毒感染對PI3K/Akt通路的影響;EV71病毒感染對線粒體細胞色素C釋放的影響;EV71病毒感染對細胞質Bax蛋白遷移轉運的影響;EV71病毒感染對JNK介導細胞凋亡的影響;EV71感染細胞后,PI3K/Akt通路對細胞凋亡的影響;以及EV71病毒感染后,PI3K/Akt對JNK通路的影響,最終闡明EV71病毒激活PI3K/Akt信號通路抑... 

【文章來源】：黑龍江八一農墾大學黑龍江省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1 文獻綜述
    1.1 手足口病
    1.2 腸道病毒71型
    1.3 EV71病毒顆粒結構
    1.4 EV71病毒基因組結構
    1.5 EV71病毒基因分型
    1.6 EV71病毒復制
    1.7 應激顆粒參與EV71病毒復制與信號轉導
    1.8 EV71激活PI3K/Akt信號通路
    1.9 研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 細胞與病毒
        2.1.2 抗體和抑制劑
        2.1.3 主要儀器和耗材
    2.2 實驗方法
        2.2.1 SiRNA和瞬時轉染
        2.2.2 亞細胞成分的分離
        2.2.3 免疫共沉淀和Western Blot分析
        2.2.4 免疫熒光檢測
        2.2.5 流式細胞術分析
3 結果與分析
    3.1 EV71病毒感染激活RD細胞PI3K/Akt通路
    3.2 EV71病毒感染誘導細胞色素C的釋放
    3.3 EV71病毒感染誘導Bax蛋白的轉位和活化
    3.4 JNK激活促進EV71病毒誘導的細胞凋亡
    3.5 抑制PI3K/Akt通路增強細胞凋亡
    3.6 PI3K/Akt通路通過促進磷酸化ASK1而抑制JNK通路的激活
4 討論
    4.1 抑制凋亡模式圖
    4.2 抑制凋亡分析
    4.3 總結
5 結論
參考文獻
致謝
附錄
個人簡歷



本文編號：3421527