本文關鍵詞：手術減壓對大鼠脊髓撞擊并壓迫模型的神經(jīng)細胞自噬與凋亡影響的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察手術減壓對大鼠脊髓撞擊并壓迫模型的脊髓組織細胞自噬與凋亡的影響,探討手術減壓促進脊髓功能恢復的機制。方法:清潔級Sprague-Dawley大鼠72只,體重250~300g,按隨機數(shù)字表法分為持續(xù)壓迫組(n=24)、手術減壓組(n=24)、假手術組(n=24)。采用Allen’s法+自制壓迫件置入椎管造成脊髓急性損傷合并椎管內占位,各組分別在造模后8h、24h、3d、7d取材。采用BBB評分法評估大鼠后肢運動功能變化,RTFQ-PCR檢測樣本Beclin-1 mRNA和Bcl-2 mRNA表達,免疫熒光法檢測自噬相關蛋白LC3的表達,活性檢測試劑盒測定半胱氨酰天冬氨酸特異性蛋白酶-3(Caspase-3)的活性。結果:1、BBB評分:持續(xù)壓迫組和手術減壓組SD大鼠脊髓損傷后3d始見下肢活動,兩組比較無統(tǒng)計學差異;造模后7d手術減壓組大鼠BBB評分高于持續(xù)壓迫組(P0.05);假手術組大鼠BBB評分在術后8h、24h、3d、7d相互間比較無統(tǒng)計學差異。2、熒光定量PCR結果2.1在各個時間點,持續(xù)壓迫組和手術減壓組大鼠脊髓組織Beclin-1mRNA表達水平均較假手術組升高(P0.05),持續(xù)壓迫組高于手術減壓組(P0.05)。2.2損傷后24h、3d、7d,手術減壓組大鼠脊髓組織Bcl-2mRNA表達水平高于持續(xù)壓迫組(P0.05)。3、免疫熒光染色:熒光顯微鏡下觀察到LC3在持續(xù)壓迫組和手術減壓組神經(jīng)細胞中均有較高表達。在各對應時間點,手術減壓組LC3陽性細胞計數(shù)低于持續(xù)壓迫組(P0.05)。4、Caspase-3活性檢測結果:手術減壓組Casepase-3活性在損傷后8h、24h、3d、7d較持續(xù)壓迫組均降低(P0.05)。結論:1、脊髓損傷后,自噬在神經(jīng)細胞中的表達升高,手術減壓可以使脊髓損傷后細胞自噬的表達下降。2、脊髓損傷后,凋亡在神經(jīng)細胞中的表達增強,手術減壓降低脊髓損傷后細胞凋亡的表達。3、手術減壓能夠促進大鼠脊髓撞擊并壓迫模型神經(jīng)功能恢復,可能與抑制細胞凋亡、降低細胞自噬表達有關。
【關鍵詞】：脊髓損傷 自噬 凋亡 減壓 大鼠
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R651.2;R-332
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 引言10-12
• 第2章 材料與方法12-20
• 2.1 材料12-14
• 2.1.1 實驗手術器械12
• 2.1.2 主要試劑12
• 2.1.3 主要溶液的配制12-13
• 2.1.4 實驗儀器13-14
• 2.2 方法14-19
• 2.2.1 實驗動物分組14
• 2.2.2 動物模型的制作14-15
• 2.2.3 術后處理15
• 2.2.4 BBB評分15-16
• 2.2.5 樣本采集16-17
• 2.2.6 RTFQ-PCR17
• 2.2.7 免疫熒光染色17-18
• 2.2.8 Caspase-3活性檢測18-19
• 2.3 數(shù)據(jù)分析19-20
• 第3章 結果20-26
• 3.1 大鼠后肢運動功能評分20-21
• 3.2 Beclin-1 mRNA表達水平21-22
• 3.3 Bcl-2 mRNA表達水平22-23
• 3.4 LC3免疫熒光染色23-24
• 3.5 Caspase-3活性檢測24-26
• 第4章 討論26-29
• 第5章 結論與展望29-30
• 5.1 結論29
• 5.2 展望29-30
• 致謝30-31
• 參考文獻31-35
• 附圖35-37
• 攻讀學位期間的研究成果37-38
• 綜述 創(chuàng)傷性脊髓損傷的病理機制研究進展38-45
• 參考文獻43-45

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  本文關鍵詞：手術減壓對大鼠脊髓撞擊并壓迫模型的神經(jīng)細胞自噬與凋亡影響的實驗研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：341628