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骨形態(tài)發(fā)生蛋白2/7異二聚體對人脂肪間充質(zhì)干細胞成骨分化的促進作用

發(fā)布時間:2021-09-25 13:13
  目的:探討新型成骨誘導生長因子骨形態(tài)發(fā)生蛋白2/7異二聚體(bone morphogenetic protein 2/7heterodimer,BMP-2/7)在誘導人脂肪間充質(zhì)干細胞(human adipose-derived stem cells,h ASCs)成骨分化中的作用。方法:體外培養(yǎng)h ASCs,以成骨誘導培養(yǎng)基(osteogenic medium,OM)中添加150μg/L BMP-2/7為實驗組,以單純OM為陽性對照組(OM組),以常規(guī)增殖培養(yǎng)基(proliferation medium,PM)為陰性對照組(PM組)。體外誘導的第1、4和7天檢測細胞DNA含量,第7和14天進行堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色及定量檢測,第21和28天進行茜素紅染色及定量檢測,第1、4、7和14天分別進行成骨相關(guān)基因的檢測。體內(nèi)實驗使用6只裸鼠,于其背部正中做皮膚切口,向兩側(cè)分離出4個皮下植入腔,分別植入:(1)單純β-磷酸三鈣(β-tricalcium phosphate,β-TCP)支架(支架對照組);(2)β-TCP支架+h ASCs(體外PM培... 

【文章來源】:北京大學學報(醫(yī)學版). 2016,48(01)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:8 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1. 1 細胞
    1. 2 主要試劑
    1. 3 h ASCs體外成骨誘導及相關(guān)檢測
        1.3.1細胞DNA含量測定
        1.3.2 ALP染色
        1.3.3 ALP活性定量分析
        1.3.4茜素紅礦化結(jié)節(jié)染色及定量
        1.3.5實時熒光定量PCR檢測成骨相關(guān)基因的表達
    1. 4動物體內(nèi)植入實驗
    1. 5 標本制取、組織學切片
    1. 6 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果
    2. 1 細胞DNA含量測定
    2. 2 ALP染色
    2. 3 ALP活性定量分析
    2. 4 茜素紅礦化結(jié)節(jié)染色及定量
    2. 5 實時熒光定量PCR檢測成骨分化相關(guān)基因的表達
    2. 6 組織學切片染色結(jié)果
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]應用游離腓骨復合組織瓣行功能性重建上頜骨缺損[J]. 彭歆,毛馳,俞光巖,郭傳瑸,黃敏嫻,張益,馬蓮,鄧旭亮,林野,馬大權(quán),孟兆強,張雷.  北京大學學報(醫(yī)學版). 2011(01)
[2]牙周維護治療在保持牙周長期療效中的作用[J]. 張勇,欒慶先.  北京大學學報(醫(yī)學版). 2011(01)



本文編號:3409804

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