目的:采用經典離體動物癲癇模型,即無鎂細胞外液孵育神經元導致異常放電,模擬癲癇發(fā)作過程,觀察鈣敏感受體（calcium-sensing receptor,CaSR）在無鎂細胞外液共同孵育神經元與心肌細胞中的表達變化,探討CaSR在無鎂細胞外液孵育神經元與心肌細胞中的表達及與絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated potein kinase,MAPK）通路的關系。方法:采用無鎂細胞外液孵育神經元與心肌細胞,用模擬缺血培養(yǎng)液培養(yǎng)3小時后,更換為正常DMEM培養(yǎng)液常規(guī)培養(yǎng)6小時的方法建立新生大鼠神經元與心肌細胞共培養(yǎng)癲癇模型。利用MTT比色法、HE染色和透射電鏡檢測神經元與心肌細胞存活率和形態(tài)變化;Western blot等方法觀察CaSR蛋白的表達。以精胺（CaSR的激動劑）和calhex231（CaSR的抑制劑）作為干預因素,Western blot檢測MAPK通路的蛋白表達,觀察CaSR在無鎂細胞外液孵育神經元與心肌細胞中的表達及MAPK通路在其中的作用。結果:經HE染色、透射電鏡結果顯示對照組神經元與心肌細胞胞體完整,細胞膜無破損,完整性較好;無鎂組細胞結構受損,細胞... 

【文章來源】：佳木斯大學黑龍江省

【文章頁數】：48 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

Ca2+穩(wěn)態(tài)在器官中的調節(jié)

A B CD E圖1HE 染色結果（40X10）注：A：對照組；B：無鎂組；C：無鎂+精胺組；D：無鎂+calhex231 組；E：無鎂+精胺+calhex231 組。

無鎂+Chalhex231 組 6 82.80±14.37無鎂+精胺+Chalhex231 組 6 82.04±17.37圖3 細胞存活率注：A、B、C、D、E 五組分別為對照組、無鎂組、無鎂+精胺組、無鎂+calhex231 組、無鎂+精胺+calhex231 組�！� 表示無鎂組VS 無鎂+精胺組顯著增高(p<0.01)。四、Western blot 測定蛋白量經 Western blot 蛋白測定結果顯示 Bcl-2、P-ERK 蛋白表達量對照組高于無鎂組(p<0.01)，而無鎂組高于無鎂+精胺組、無鎂+精胺+calhex231 組(p<0.05)。CaSR 蛋白量對照組低于無鎂組(p<0.05)，無鎂組低于無鎂+精胺組、無鎂+精胺+calhex231 組(p<0.01)。P-JNK 蛋白量對照組低于無鎂組(p<0.05)，無鎂組明顯低于無鎂+精胺組

【參考文獻】：
期刊論文
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[2]正常及無鎂誘導后神經元微環(huán)境對少突膠質前體細胞分化的影響[J]. 王玥,蔣莉,劉麗鳴,楊霞,陳恒勝,程莉.  重慶醫(yī)科大學學報. 2016(08)
[3]鈣敏感受體表達和Pi3k/Akt通路調控癲癇大鼠心肌細胞凋亡的研究[J]. 王麗敏,韓小唯,王超,張鑫陽,王淑靜,白玲玲,孫艷秋,郭津.  中國兒童保健雜志. 2016(05)
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[8]心血管系統(tǒng)鈣敏感受體的研究進展[J]. 徐長慶,張偉華.  中國病理生理雜志. 2010(02)
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碩士論文
[1]鈣敏感受體在小鼠缺血性腦卒中的作用及機制[D]. 甄毅嵐.安徽醫(yī)科大學 2014



本文編號：3394900