發(fā)布時間：2021-09-05 18:48

　　目的:為研究牛磺酸轉(zhuǎn)運體（TauT）在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的作用,構(gòu)建并繁育腦特異性表達(dá)TauT轉(zhuǎn)基因模型大鼠(TauT^+/-大鼠)。方法:將TAUT c DNA插入腦特異性PDGF啟動子下游,構(gòu)建轉(zhuǎn)基因表達(dá)載體,顯微注射法建立TAUT轉(zhuǎn)基因大鼠。Genotype鑒定轉(zhuǎn)基因大鼠的基因型。經(jīng)過配種繁殖和鑒定后,繪制2～8月齡生長曲線、測定各臟器質(zhì)量、臟體系數(shù)和臟腦系數(shù);RT-PCR技術(shù)檢測TauT^+/-大鼠大腦組織中Slc6a6 mRNA基因表達(dá)水平;Western blot檢測TauT^+/-大鼠在大腦、心、肝組織的TauT蛋白表達(dá),并對TauT^+/-大鼠大腦組織進(jìn)行免疫組化染色和HE染色,IPP軟件對免疫組化圖像進(jìn)行處理。結(jié)果:成功構(gòu)建PDGF-Slc6a6表達(dá)質(zhì)粒,得到3只TauT^+/-大鼠F0代。經(jīng)過繁殖和鑒定,與同窩陰性大鼠（TauT-/-大鼠）比較,TauT^+/-大鼠大腦組織Slc6a6 mRNA基因表達(dá)水平顯著升高,大腦、心、肝組織TauT蛋白表達(dá)水平... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2020,26(01)

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

PDGF-Slc6a6重組質(zhì)粒構(gòu)建

TauT+/-大鼠DNA PCR鑒定

如圖5～7,RT-PCR結(jié)果表明TauT+/-大鼠在大腦組織中的Slc6a6基因mRNA表達(dá)水平較TauT-/-大鼠顯著升高（P<0.05），融解曲線顯示只有內(nèi)參基因GAPDH和Slc6a6基因的融解峰，擴(kuò)增產(chǎn)物分別在81℃和85℃時出現(xiàn)單一峰，擴(kuò)增特異性較好。圖4 2～8月TauT+/-大鼠體質(zhì)量生長曲線

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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