主要培養(yǎng)能發(fā)展:在體外系統(tǒng)的神經(jīng)和神經(jīng)再生
發(fā)布時(shí)間:2021-04-25 08:48
血腦屏障是高度分化的大腦神經(jīng)血管系統(tǒng)中一種非常特殊的內(nèi)皮結(jié)構(gòu)。這種具有具有選擇透過性的屏障,是由大腦微血管中的內(nèi)皮細(xì)胞形成的。在體內(nèi)環(huán)境中,內(nèi)皮細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元之間存在著密切的相互作用,這種相互作用對(duì)血腦屏障的形成及功能發(fā)揮起著重要作用。由于血腦屏障其重要生理功能,如很多神經(jīng)變性疾病中,血腦屏障往往會(huì)成開放狀態(tài),因此在最近的十年中,更多的研究轉(zhuǎn)移到了建立體外的血腦屏障模型。本次研究,我們首先獲得原代SD大鼠大腦皮質(zhì)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元。然后將毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞種植于內(nèi)插小室(insert)的半透膜內(nèi)室面上,其于半透膜微孔孔徑為1μm。而星形膠質(zhì)細(xì)胞種植與該內(nèi)插小室的半透膜外室面上。再將生長有毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的insert放置于已長有神經(jīng)元的24孔培養(yǎng)板底孔(well)上,最終形成EAN(endothelial cell, astrocyte,neuron)系統(tǒng)。系統(tǒng)建立完成后,我們首先通過免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)對(duì)單獨(dú)培養(yǎng)和共培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行染色,并對(duì)其形態(tài)進(jìn)行了分析。同時(shí)通過測(cè)定跨內(nèi)皮細(xì)胞電阻及通透系數(shù),來評(píng)估本次EAN體外系統(tǒng)中內(nèi)皮細(xì)胞之間的緊密連接程...
【文章來源】:大連醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
Introduction
Materials and Methods
3.1 Animals, reagents and solutions
3.2 Isolation and culture of neonatal rat Cerebral Cortex Astrocytes
3.3 Isolation and culture of neonatal rat Cerebral Cortex Neurons
3.4 Isolation and culture of rat Cerebral Capillary Endothelial cells(CCEC)
3.5 Co-cultures EA/AN and EAN
3.6 Immunocytochemistry (ICC)
3.7 Permeability measurements
3.8 Transmission electron microscopy (TEM)
Results
Discussions
Conclusions
References
Literature Review
Appendix
Acknowledgments
本文編號(hào):3159089
【文章來源】:大連醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
Introduction
Materials and Methods
3.1 Animals, reagents and solutions
3.2 Isolation and culture of neonatal rat Cerebral Cortex Astrocytes
3.3 Isolation and culture of neonatal rat Cerebral Cortex Neurons
3.4 Isolation and culture of rat Cerebral Capillary Endothelial cells(CCEC)
3.5 Co-cultures EA/AN and EAN
3.6 Immunocytochemistry (ICC)
3.7 Permeability measurements
3.8 Transmission electron microscopy (TEM)
Results
Discussions
Conclusions
References
Literature Review
Appendix
Acknowledgments
本文編號(hào):3159089
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