研究背景:肺炎克雷伯菌（Klebsiella Pneumoniae,KP）是一種較短粗的革蘭陰性桿菌,無芽胞,無鞭毛,有較厚的莢膜,多數(shù)有菌毛。肺炎克雷伯菌是人類正常微生物菌群主要的組成細菌之一,同時也是一種機會致病菌,當機體免疫力低下時可逃避宿主免疫反應而致病。肺炎克雷伯菌能夠擾亂正常的微生物菌群并在胃腸中進行初始定植同時抑制宿主免疫。自20世紀70年代以來,由于抗生素濫用導致多種細菌出現(xiàn)廣泛耐藥性,近年來多重耐藥致病菌的數(shù)量急劇增加。多重耐藥的肺炎克雷伯菌感染是全球醫(yī)院感染的主要病因之一,在住院患者中易引起尿路感染、肺炎和腹腔內(nèi)感染,尤其在醫(yī)院重癥監(jiān)護病房革蘭氏陰性菌感染中,約15%是由多重耐藥肺炎克雷伯菌引起。1996年Mackenzie等首次報道耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌（Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP）,隨后CRKP陸續(xù)在美國、英國、雅典、中國等地被發(fā)現(xiàn)。碳青霉烯酶是肺炎克雷伯菌對碳青霉烯類藥物耐藥的主要原因,它能夠有效的水解青霉素、頭孢菌素、氨曲南、碳青霉烯類等多種抗生素。碳青霉烯酶的相關耐藥基因主要位于質(zhì)粒和轉(zhuǎn)... 

【文章來源】：廣州中醫(yī)藥大學廣東省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

秀麗隱桿線蟲生活史在實驗室中，線蟲通常在含有大腸桿菌菌苔的瓊脂平板上生長，當細菌消耗殆盡，可利用自身的脂肪供應

圖 2 不同培養(yǎng)條件對 CRKP 感染后線蟲存活率的影響蟲-CRKP 感染模型中感染濃度的選擇顯微鏡下觀察未感染的線蟲呈正弦運動，并伴有口咽部的活動（圖 3A）；的線蟲，其腸道明顯膨脹，身體呈僵直不動的狀態(tài)，無口咽部的活動（圖 3觀察到感染和未感染的線蟲行為學出現(xiàn)明顯改變，感染后的線蟲不能馬上達態(tài)，往往處于一種緩慢致死的虛弱狀態(tài)。用不同濃度的 CRKP 感染線蟲 36 小時后，觀察線蟲的活動情況。在不同的（108cfu/mL、 107cfu/mL、 106cfu/mL、 105cfu/mL、空白對照組）下，最活動的線蟲分別為 7.84% 、3.448%、6.667%、3.7%、100%（圖 3C）。各陰性對照組相比均具有明顯的統(tǒng)計學差異（χ2=56.44 P<0.0001），不同起始對于線蟲均能達到初步感染的目的，使線蟲自主活動喪失。其中 108cfu/m半數(shù)線蟲出現(xiàn)自主運動消失的初步感染時間大約為 9h、 107cfu/mL 感染組106cfu/mL、105cfu/mL 組分別為 15h、18h。為盡可能縮短試驗用時同時控制生長繁殖，選擇 106cfu/mL 終濃度為試驗起始菌液濃度。

A：感染前線蟲的形態(tài)（10X）； B：感染后線蟲的形態(tài)（10X）；C：不同菌量的 CRKP 感染線蟲后線蟲的生存曲線圖 3 不同濃度 CRKP 感染的秀麗隱桿線蟲生存曲線KP 感染線蟲后細菌在體內(nèi)的分布一步證實線蟲腸道的膨脹是由于 CRKP 的定植，實驗采用細胞熒光標P、OP50，來找到細菌作用于線蟲的可能感染路徑。兩組均與線蟲共培光顯微鏡觀察菌體在線蟲中的分布。結(jié)果表明，對照組線蟲未出現(xiàn)細長。（圖 4A），而感染后的線蟲腸道內(nèi)充滿了進食后標記了紅色致腸腔膨脹（圖 4B、C）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]秀麗隱桿線蟲-泛耐藥肺炎克雷伯菌感染模型的建立[J]. 王訊,孫樹梅,歐陽妮,張亞莉,芮勇宇.  中國感染控制雜志. 2016(07)
[2]秀麗隱桿線蟲-白念珠菌感染模型用于抗真菌藥效評價的研究[J]. 畢爽,胡淦海,胡丹丹,姜遠英,王彥.  中國真菌學雜志. 2016(03)
[3]利用秀麗隱桿線蟲構(gòu)建抗菌物質(zhì)體內(nèi)篩選模型[J]. 陳麗紅,孫利芹,王長海.  煙臺大學學報(自然科學與工程版). 2012(02)
[4]秀麗隱桿線蟲-耐藥銅綠假單胞菌感染模型的建立[J]. 周雨朦,陳代杰,李繼安,邵雷,朱春寶.  中國抗生素雜志. 2011(07)



本文編號：3069524