目的:建立同時測定糖尿病模型大鼠體內沙格列汀及其代謝產物5-羥基沙格列汀血藥濃度的方法。方法:采用超高效液相色譜-串聯質譜法。色譜柱為Waters BEH Shield RP₁₈,流動相為10 mmol/L乙酸銨-乙腈（70∶30,V/V）,流速為0.3 m L/min,柱溫為30℃,進樣量為10μL;掃描模式為多反應監(jiān)測,正離子模式,各離子對為m/z 316.2→180.2（沙格列�。/z 332.3→196.2（5-羥基沙格列�。�、m/z 304.2→153.9（維格列汀,內標）。取6只SD大鼠,復制糖尿病模型后,ig沙格列汀0.53 mg/kg,于給藥前及給藥后0.25、0.5、0.75、1.0、1.5、2.0、4.0、6.0、8.0、12.0、24.0 h經眼眶取血0.25 m L,測定血漿中沙格列汀及其代謝物5-羥基沙格列汀的濃度,采用Win Nonlin 6.1軟件計算藥動學參數。結果:沙格列汀和5-羥基沙格列汀的質量濃度線性范圍為0.1¹00（r=0.997 2）、0.2²00 ng/m L（r=0.9... 

【文章來源】：中國藥房. 2017,28(16)北大核心

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5.9％～107.8％、83.5％～88.2％（RSD均小于10.3％，n＝6）；穩(wěn)定性試驗（室溫放置24h、－80℃和室溫下反復凍融3次、－80℃凍存90d及吹干后殘渣在室溫放置24h）峰面積的RSD≤11.0％（n＝5）。2.8藥動學研究取6只大鼠，高脂飼料喂養(yǎng)1個月后，ip鏈脲佐菌素誘導T2DM模型。造模前禁食、自由飲水12h。按臨床上沙格列汀給藥劑量進行換算，ig0.53mg/kg沙格列汀溶液，分別于給藥前和給藥后0.25、0.5、0.75、1.0、1.5、2.0、4.0、6.0、8.0、12.0、24.0h經大鼠眼眶靜脈叢取血0.25mL，置于經抗凝處理的離心管中，3500r/min離心圖1二級碎片全掃描質譜圖Fig1Fullscanningproductionspectraofthesecond-aryfragments4.0×1053.2×1052.4×1051.6×1058.0×1040度強，psc150200250300350m/zA.沙格列汀2.8×1072.4×1072.0×1071.6×1071.2×1078.0×1064.0×1060度強，psc60120180240300340m/zB.5-羥基沙格列汀1.00×1088.00×1076.00×1074.00×1072.00×1070度強，psc60120180240300340m/zC.內標圖2超高效液相色譜圖Fig2UPLCchromatograms400200強度0，psc0.40.81.21.62.02.42.8時間，minA.空白血漿3.7×1042.0×104強度0，psc400200強度0，psc400200強度0，psc0.40.81.21.62.02.42.8時間，minB.空白血漿+沙格列汀+5-羥基沙格列汀+內標2.0×1041.0×1040度強，psc3.6×1042.0×1040度強，psc3.0×1051.0×105強度0，psc0.40.81.21.62.02.42.8時間，minC.給藥0.5h后大鼠血漿樣品+內標3.8×1042.0×10407.4×1044.0×104

ChinaPharmacy2017Vol.28No.16中國藥房2017年第28卷第16期5min，分離血漿，置于－80℃冰箱保存，備用。采用超高效液相色譜-串聯質譜（UPLC-MS/MS）法測定不同時間點的沙格列汀和5-羥基沙格列汀的血藥濃度，藥-時曲線見圖3。采用WinNolin6.1軟件按照非房室模型進行處理，計算藥動學參數，結果見表1。3討論本文建立了穩(wěn)定性好、通用性強、可靈敏快速測定大鼠血漿中沙格列汀及其代謝物5-羥基沙格列汀血藥濃度的方法，并成功地應用于大鼠藥動學研究。本實驗起初采用BEHC18色譜柱，使用甲醇作為流動相，結果5-羥基沙格列汀的定量下限達不到檢測要求；在流動相中添加乙腈后5-羥基沙格列汀的響應值提高，但檢測物峰形變差。使用WatersBEHShieldRP18色譜柱摸索方法時流動相水相嘗試過0.1％甲酸、0.1％甲酸-5mmol/L甲酸銨，但是隨著水相比例的增加檢測物的峰形變差且分叉成雙峰，故選擇不添加甲酸，且試驗發(fā)現添加乙酸銨比添加甲酸銨靈敏度高、響應好，故最終選擇10mmol/L乙酸銨-乙腈作為流動相體系。樣品處理時考慮到沙格列汀游離堿在水中微溶，在二氯甲烷及乙酸乙酯中溶解，但5-羥基沙格列汀的水溶性好，用乙酸乙酯、二氯甲烷基本無法提取，因此液液萃取同時提取兩者比較困難，常規(guī)的液液萃取處理方法不適合該血漿樣品的處理。而乙腈蛋白質沉淀法處理血漿樣品的基質效應及提取回收率均滿足相關的要求[11]，故最終采用乙腈蛋白質沉淀法預處理。綜上所述，本研究建立的方法簡便、準確、專屬性強，適用于沙格列汀及其代謝產物5-羥基沙格列汀在大鼠體內的藥動學研究。參考文獻[1]BoultonDW.Clinicalpharmacokineticsandpharmacody-namicsofsaxagliptin，adipeptidylpeptidase-4inhibitor[J].ClinPharmacokinet，2017，56（

【參考文獻】：
期刊論文
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[2]2型糖尿病治療新藥沙格列汀的藥理及臨床評價[J]. 陸菊明.  中國新藥雜志. 2011(21)



本文編號：3066831