目的:構(gòu)建I-A^d/IgG2b Fc桿狀病毒表達(dá)載體,使其在Sf9昆蟲細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。方法:利用RT-PCR從BALB/c小鼠淋巴細(xì)胞中擴(kuò)增出I-A^dα、I-A^dβ和IgG2b Fc目的基因序列,運(yùn)用重疊PCR將I-A^dα和I-A^dβ分別與Fos和Jun的亮氨酸拉鏈序列相連,形成I-A^dα-Fos和I-A^dβ-Jun;利用酶切位點(diǎn)XbaⅠ將I-A^dα-Fos與IgG2b Fc段相連,形成I-A^dα-Fos-IgG2b Fc重組序列;分別將I-A^dα-Fos-IgG2b Fc和I-A^dβ-Jun插入桿狀病毒表達(dá)載體pFastBac^TMDual的P_PH和P_P10兩個(gè)啟動(dòng)子的下游,構(gòu)建出重組載體pFastBac^TMDual+[I-A^d/IgG2b F... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)免疫學(xué)雜志. 2017,33(04)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 質(zhì)粒、菌株與細(xì)胞系
        1.1.2 試劑
    1.2 方法
        1.2.1 重組載體的構(gòu)建
        1.2.2 重組載體的鑒定
        1.2.3 融合蛋白的表達(dá)、濃縮及檢測(cè)
2 結(jié)果
    2.1 目的基因片段的獲取
    2.2 I-Ad重組載體PCR及酶切鑒定
    2.3 融合蛋白的檢測(cè)及鑒定
3 討論



本文編號(hào)：3042051