目的:研究mi R-181a/b通過血清反應(yīng)因子（SRF,serum response factor）對血管平滑肌細胞向合成型表型轉(zhuǎn)化及細胞增殖遷移能力的調(diào)控作用。方法:將mi R-181a/b瞬時轉(zhuǎn)染至人主動脈平滑肌細胞（HAo SMCs）中,用實時定量PCR、CCK-8檢測方法和transwell實驗分別檢測平滑肌細胞的表型標記基因的表達水平、細胞增殖能力和遷移能力的變化。生物信息學(xué)分析預(yù)測mi R-181a/b直接靶向血清反應(yīng)因子的3’UTR（非編碼區(qū)）,并通過實時定量PCR、western blot及雙熒光素酶報告系統(tǒng)分別驗證。結(jié)果:實時定量PCR結(jié)果表示在HAo SMCs中過表達mi R-181a/b能夠抑制收縮表型標記基因的表達,促進合成表型標記基因的表達,CCK-8與transwell實驗結(jié)果表明mi R-181a/b增強細胞的增殖和遷移能力。雙熒光素酶報告系統(tǒng)與western blot結(jié)果表明Mi R-181a/b能夠直接靶向SRF,抑制SRF的蛋白表達。結(jié)論:mi R-181a/b通過直接靶向血清反應(yīng)因子的3’UTR促進平滑肌細胞由收縮型表型向合成型表型轉(zhuǎn)化。 

【文章來源】：青海大學(xué)青海省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

平滑肌細胞的兩種表型及特征

圖 1.2 平滑肌細胞表型相關(guān)基因表達水平示意圖[1]Fig 1.2 Schematic representation of expression level of genes associated with SMCphenotype[1]注：許多基因可作為平滑肌兩種表型的標記基因，圖中標注的為本實驗所選取的標記

參與調(diào)控平滑肌細胞表型的生化因子及機制[71]


本文編號：3030723