[目的]季節(jié)性流感的年度流行和大流感的潛在威脅給人類健康和社會穩(wěn)定帶來極大挑戰(zhàn)。流感病毒具有高發(fā)的突變率和基因重配特點,使廣譜流感疫苗的開發(fā)和抗病毒藥物的研制受到限制,目前使用的流感裂解疫苗主要以病毒蛋白HA、NA為疫苗的主要組成抗原,但HA、NA易發(fā)生抗原漂移和轉換的特性使現(xiàn)有的季節(jié)性流感疫苗毒株每年都需要根據(jù)WHO預測的流行株而進行更換和生產(chǎn)。這種毒株篩選和制備工藝的滯后性無法滿足各國衛(wèi)生部門對流感防控的快速反應和廣譜性要求。因此篩選和開發(fā)具有流感病毒保守抗原的亞單位疫苗,通過結構生物學、納米技術進行抗原呈遞的技術平臺成為了流感通用疫苗的重要研究方向。在這個領域,病毒基質蛋白M2胞外部分具有在甲型流感病毒中的良好保守性和較好抗原性,成為通用流感疫苗的候選抗原之一。同時,來源于幽門螺桿菌（Helicobacter pylori）鐵蛋白（Ferritin）可以自我折疊成24個亞單位組成的八面體球形納米顆粒,融合表達特定病原體基因片段后具備良好的抗原性和免疫原性。這為本課題使用流感病毒跨膜蛋白M2胞外部分,在ferritin蛋白的引導下進行融合表達,并自組裝納米顆粒,進行實驗性疫苗的探索... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學云南省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１：流感結構示意圖??７??

蛋白外殼是由２４個鐵蛋白亞基自組裝而成球形空心納米籠狀結構，??其中每３個亞基組成一個三聚體亞單位，８個三聚體再組裝成一個外徑１２?ｎｍ，??內徑８?ｎｍ的外殼（圖２）。鐵核則位于納米籠狀結構之中，其主要成分為水鐵??礦，主要為起抗氧化劑作用的氧化結合位點［２７］。??Ｅｘｔｅｒｉｏｒ?ｓｕｒｆａｃｅ?Ｉｎｔｅｒｉｏｒ?ｃａｖｉｔｙ??＿暴??圖２：鐵蛋白鐵蛋白內表面和外表面剖面圖??１１??

Ａ?Ｂ??圖１：雙酶切，并進行ＰＣＲ鑒定??２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ，?６Ｈｉｓ－Ｍ２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ，ｐｃＤＮＡＴＭ３．１（＋）載體雙酶切電２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ?，?ＳＮＡＰ?表達載體雙酶切電泳鑒定。Ｍ：ＤＬ?５０００?ＤＮ為?Ｍ２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ?，?６Ｈ】ｓ－?Ｍ２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ?，?ｐｃ?ＤＮＡ？３．］（＋）空載體，ＳＮＡＰ表達載體。??Ｍ２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ納米組裝顆粒表達及驗證??跡??疫印跡試驗方法來分析Ｍ２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ自組裝納米顆粒ｃ?ＤＮＡＴＭ３．１－Ｍ２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ，ＳＮＡＰ－?Ｍ２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ?重組質于４８?ｈ后對細胞進行變性蛋白提取，通過變性膠用

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3014853