目的:研究血紅素加氧酶1（hemeoxygenase 1,Hmox1）在骨形態(tài)發(fā)生蛋白9（bone morphogenetic proteins 9,BMP9）誘導(dǎo)下間充質(zhì)干細(xì)胞C3H10T1/2向成骨分化過程中發(fā)揮的作用。方法:用Ad-BMP9感染C3H10T1/2,分別用Q-PCR和Western blot檢測(cè)Hmox1mRNA和蛋白水平的變化;Hmox1激動(dòng)劑COPP處理BMP9誘導(dǎo)的C3H10T1/2細(xì)胞,堿性磷酸酶（ALP）染色和活性測(cè)定檢測(cè)早期成骨指標(biāo)ALP的變化;過表達(dá)Hmox1的重組腺病毒（Ad-Hmox1）處理BMP9誘導(dǎo)的C3H10T1/2細(xì)胞,ALP染色和活性測(cè)定早期成骨指標(biāo)ALP,茜素紅染色檢測(cè)晚期成骨指標(biāo)鈣鹽沉積,Western blot檢測(cè)成骨相關(guān)基因COL1A1。結(jié)果:Ad-BMP9感染C3H10T1/2后,Hmox1的mRNA及蛋白水平均升高;BMP9與Hmox1激動(dòng)劑COPP聯(lián)用與BMP9組相比ALP的活性增強(qiáng);Ad-Hmox1可以增強(qiáng)BMP9誘導(dǎo)下C3H10T1/2細(xì)胞的ALP活性和鈣鹽沉積,以及成骨相關(guān)基因COL1A1表達(dá)。結(jié)論:Hmox1可以促進(jìn)... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)生物工程雜志. 2017,37(04)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 試劑
    1.3 引物設(shè)計(jì)
    1.4 質(zhì)粒構(gòu)建和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
        1.4.1 穿梭質(zhì)粒p Ad Trace-TO4-Hmox1構(gòu)建
        1.4.2 重組質(zhì)粒構(gòu)建和腺病毒包裝
        1.4.3 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.4.4 條件培養(yǎng)基的制備
        1.4.5 Q-PCR
        1.4.6 Western blot
        1.4.7 堿性磷酸酶染色及活性測(cè)定
        1.4.8 鈣鹽沉積實(shí)驗(yàn)
    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 BMP9對(duì)C3H10T1/2細(xì)胞內(nèi)源性Hmox1表達(dá)的影響
    2.2 構(gòu)建穿梭質(zhì)粒
    2.3 包裝腺病毒
    2.4 Hmox1腺病毒功能驗(yàn)證
    2.5 Hmox1對(duì)BMP9誘導(dǎo)的C3H10T1/2早期成骨分化的影響
    2.6 Hmox1對(duì)BMP9誘導(dǎo)的C3H10T1/2晚期成骨分化的影響
    2.7 Hmox1對(duì)BMP9誘導(dǎo)下C3H10T1/2細(xì)胞的成骨指標(biāo)COL1A1的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]RUNX2對(duì)BMP9誘導(dǎo)的間充質(zhì)干細(xì)胞C3H10T1/2成骨分化的影響[J]. 趙艷芳,宋濤,劉躍亮,羅進(jìn)勇.  中國(guó)生物工程雜志. 2013(02)



本文編號(hào)：3014018