[目的]檢測布魯氏菌BMEII0988基因的原核表達情況并對其免疫原性進行分析。[方法]以熱滅活的布魯氏菌16M標準株為模板,根據(jù)Gen Bank中公布的羊種布魯氏菌16M的BMEII0988基因序列分別設計引物,用PCR方法擴增BMEII0988基因的編碼序列,連接到T載體測序,將測序正確的基因序列克隆到原核表達載體p ET-32a上,轉化入大腸桿菌DE3感受態(tài)細胞中誘導表達,將獲得的目標蛋白用AKTAxpress智能多維純化系統(tǒng)進行純化,并用Western Blot分析其反應原性。[結果]BMEII0988基因長度為1 131 bp,編碼377個氨基酸,SDS-PAGE表明BMEII 0988融合蛋白在大約66 k Da處出現(xiàn)條帶,純化后條帶單一,BMEII 0988蛋白（NCBI標準序列號:WP₀02966326.1）具有較好的反應原性。[結論]該研究為下一步建立相應蛋白標記的診斷方法和疫苗的研發(fā)奠定了基礎。 

【文章來源】：生物技術. 2017,27(02)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
        1.1.1 菌株與質粒
        1.1.2 試劑
        1.1.3 儀器
    1.2 方法
        1.2.1 BMEII0988基因的擴增
        1.2.2 重組質粒的酶切鑒定
        1.2.3 BMEII 0988蛋白的表達
        1.2.4 重組蛋白BMEII 0988的純化及Western Blot分析
2 結果與分析
    2.1 目的基因的擴增
    2.2 重組表達質粒的構建及鑒定
    2.3 BMEII 0988蛋白的表達
    2.4 融合蛋白BMEII 0988的純化及Western Blot分析
3 討論
4 結論



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