發(fā)布時(shí)間：2021-01-22 17:30

　　目的:研究使用小干擾RNA（siRNA）特異性沉默體外血腦屏障模型中小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞系b. End3細(xì)胞中Epsin2的表達(dá)后對(duì)血腦屏障模型的功能及VEGFR2、ZO1、occludin表達(dá)的影響。方法:使用化學(xué)合成的siRNA特異性干擾b. End3細(xì)胞Epsin2的表達(dá),免疫熒光、Western Blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞Epsin2、VEGFR2、ZO1、occludin的表達(dá)。體外血腦屏障模型分為對(duì)照組（control）和Epsin2-siRNA干擾組（Epsin2-siRNA）,Control組使用正常b. End3細(xì)胞建立體外血腦屏障模型,Epsin2-siRNA組使用Epsin2-siRNA轉(zhuǎn)染后b. End3細(xì)胞建立體外血腦屏障模型,分別于建模24、48、72 h后進(jìn)行跨內(nèi)皮電阻測(cè)定,48 h辣根過(guò)氧化物酶（HRP）滲透試驗(yàn)測(cè)定血腦屏障模型功能。結(jié)果:轉(zhuǎn)染后b. End3細(xì)胞Epsin2免疫熒光和Western Bolt結(jié)果均提示表達(dá)下降（P <0. 05）。隨著Epsin2的表達(dá)下降,VEGFR2表達(dá)隨之下降,ZO1、occludin表達(dá)上升（P <0. ... 

【文章來(lái)源】：神經(jīng)解剖學(xué)雜志. 2019,35(06)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
材料和方法
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        1.2主要試劑及儀器
2 方法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.2 siRNA轉(zhuǎn)染
    2.3免疫熒光染色
    2.4 Western Blot
    2.5 建立體外血腦屏障模型
    2.6 HRP通透性試驗(yàn)測(cè)定BBBM通透性
    2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    1 Epsin2-siRNA抑制b.End3細(xì)胞中Epsin2的表達(dá)
    2 Epsin2沉默對(duì)b.End3細(xì)胞中VEGFR2、ZO1和occludin的表達(dá)的影響
3 Epsin2沉默后TEER值測(cè)
    4 Epsin2沉默降低體外血腦屏障模型的HRP通透性
討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞與周細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)建立體外血腦屏障模型[J]. 查雨鋒,傅曉鐘,張順,羅敏,歐瑜,董永喜,王愛民,王永林.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2015(05)
[2]血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-2所介導(dǎo)信號(hào)通路的研究進(jìn)展[J]. 康從民,王大偉,呂英濤,張媛媛.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2009(10)



本文編號(hào)：2993630