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定量檢測(cè)MERS-CoV抗原雙抗體夾心ELISA的建立及應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2020-12-27 10:22
  中東呼吸綜合征(Middle East respiratory sydrome,MERS)是由中東呼吸綜合征冠狀病毒(MERS coronavirus,MERS-CoV)感染引起的具有高病死率特點(diǎn)的一種新發(fā)傳染性呼吸系統(tǒng)疾病。MERS-CoV具有一定的人與人間傳播能力,且至今仍未有消失跡象,這引起了人們對(duì)MERS-CoV全球傳播的擔(dān)憂。然而目前對(duì)于MERS-CoV仍無有效的疫苗和治療制劑可用,因此建立快速、簡單的MERS-CoV檢測(cè)方法,進(jìn)行疫苗定量和該病的早期診斷,對(duì)有效預(yù)防和控制MERS十分必要。MERS-CoV的刺突糖蛋白(Spike,S)由N端的S1亞基和C端的S2亞基組成。位于S1亞基上的受體結(jié)合區(qū)域(Receptor Binding Domain,RBD)能通過結(jié)合宿主細(xì)胞表面DPP4受體來介導(dǎo)病毒的進(jìn)入,是誘導(dǎo)中和抗體產(chǎn)生的主要區(qū)域,因而成為各種候選疫苗和治療制劑構(gòu)建的靶標(biāo)。本研究成功制備四株鼠抗MERS-CoV S-RBD蛋白單克隆抗體,利用偶聯(lián)有選定單克隆抗體的免疫親和層析柱和陰離子交換層析柱來純化出高純度的MERS-CoV S1蛋白,并建立了定量檢測(cè)MERS-CoV... 

【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】:53 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

定量檢測(cè)MERS-CoV抗原雙抗體夾心ELISA的建立及應(yīng)用


SDS-PAGE鑒定純化的S-RBD蛋白

單抗,蛋白


er 1. mAb-1 2. mAb-3 3. 1.2 SDS-PAGE鑒定純化的單Marker 1. mAb-1 2. mAb-3ation of the purified monoantib蛋白(一抗分別為mAb-1、m1.3 Western blot鑒定純化的單 protein using mAb-1, mAb-3, mantibody, respectively.

單抗,原核,蛋白,目的


原核S-RBD蛋白進(jìn)行12%還原SDS-PA測(cè),結(jié)果如圖1.3所示,在42 KDa處均出現(xiàn)目的生反應(yīng)。白預(yù)染Marker 1. mAb-1 2. mAb-3 3. mAb-5 4. m圖1.2 SDS-PAGE鑒定純化的單抗n pre-stained Marker 1. mAb-1 2. mAb-3 3. mAb-5 1.2 Identification of the purified monoantibody by SDS-P

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Serological Study of An Imported Case of Middle East Respiratory Syndrome and His Close Contacts in China, 2015[J]. WANG Wen Ling,WANG Hui Juan,DENG Yao,SONG Tie,LAN Jia Ming,WU Gui Zhen,KE Chang Wen,TAN Wen Jie.  Biomedical and Environmental Sciences. 2016(03)



本文編號(hào):2941577

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