目的 探究肺炎克雷伯菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控子RcsAB對莢膜多糖表型的影響及對莢膜多糖相關基因galF的調(diào)控機制。方法 將肺炎克雷伯菌NTUH-K2044的野生株與rcsA、rcsB、rcsAB的敲除株和回補株進行毒力實驗和莢膜多糖相關表型實驗。采用細胞毒性實驗,莢膜多糖定量實驗以及莢膜多糖電鏡觀察,探究rcsA、rcsB基因?qū)Ψ窝卓死撞那v膜多糖的影響。同時從分子水平驗證轉(zhuǎn)錄調(diào)控子RcsAB可能通過調(diào)控莢膜多糖相關基因galF來影響莢膜多糖形成,qRT-PCR分析調(diào)控是上調(diào)或下調(diào),并運用EMSA和DNaseI足跡實驗驗證結(jié)合的基序,全面闡述RcsAB對gal F基因的調(diào)控。結(jié)果 莢膜多糖相關實驗結(jié)果顯示Rcs AB轉(zhuǎn)錄調(diào)控子正調(diào)控莢膜多糖的功能,且細胞毒性實驗顯示RcsAB調(diào)控子影響菌株毒力形成。qRT-PCR結(jié)果顯示RcsAB正調(diào)控galF基因的轉(zhuǎn)錄,EMSA結(jié)果說明galF基因不單獨與RcsA、RcsB結(jié)合,而是與RcsAB蛋白復合物結(jié)合,通過DNaseI足跡實驗顯示RcsAB蛋白復合物能直接結(jié)合到galF基因啟動子區(qū)-177bp至-155bp之間的序列上。結(jié)論 RcsAB蛋白復合物通過直接調(diào)控莢膜多糖相關基因galF正調(diào)控莢膜多糖的形成,從而影響菌株的毒力。
【學位單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R378
【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對照
中文摘要
英文摘要
前言
1 材料
2 方法
3 結(jié)果
4 討論
結(jié)論
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表學術(shù)論文

【參考文獻】

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1 Herwig Cerwenka;;Pyogenic liver abscess: Differences in etiology and treatment in Southeast Asia and Central Europe[J];World Journal of Gastroenterology;2010年20期

本文編號：2871716