目的:繁育和鑒定NSE-BMP4轉(zhuǎn)基因小鼠,為研究BMP4對出生后造血的調(diào)控提供動物模型。方法:將NSE-BMP4轉(zhuǎn)基因小鼠與C57BL/6野生型小鼠1∶1或1∶2的比例進(jìn)行交配。從子代鼠的鼠尾提取基因組DNA,采用PCR技術(shù)擴增,PCR產(chǎn)物電泳后鑒定子代鼠的基因表型。應(yīng)用Western blot技術(shù)檢測NSE-BMP4轉(zhuǎn)基因陽性小鼠和C57BL/6野生型小鼠的BMP4蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:繁育的子代鼠共363只,其中56只為陽性小鼠,BMP4基因的陽性率為15.43%。結(jié)論:成功建立了NSE-BMP4轉(zhuǎn)基因小鼠的繁育及鑒定方法,為后續(xù)研究BMP4對出生后造血的調(diào)控奠定了實驗動物基礎(chǔ)。
【部分圖文】：

對從鼠尾中提取的基因組DNA進(jìn)行PCR擴增,PCR產(chǎn)物經(jīng)1.5 %瓊脂糖凝膠電泳后在紫外分光光度儀內(nèi)曝光,如點樣孔泳道出現(xiàn)277 bp條帶,即可確定為NSE-BMP4轉(zhuǎn)基因陽性小鼠。見圖1。2.3 Western blot檢測BMP4蛋白的表達(dá)

為進(jìn)一步證實PCR鑒定結(jié)果的可靠性,本研究通過Western blot檢測NSE-BMP4轉(zhuǎn)基因陽性小鼠、野生型C57BL/6小鼠的BMP4表達(dá)水平。見圖2。2.4 NSE-BMP4轉(zhuǎn)基因小鼠的陽性率
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本文編號：2843119